ivmМеждународный вестник ветеринарииInternational Journal of Veterinary Medicine2072-2419SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2072-2419.2023.4.353ivm-1194Research ArticleАКУШЕРСТВО, ГИНЕКОЛОГИЯOBSTETRICS, GYNECOLOGYКачественные показатели спермы козлов-производителей до и после криоконсервацииQualitative indicators of sperm from producing goats before and after cryopreservationhttps://orcid.org/0000-0002-7011-4594КорочкинаЕ. А.KorochkinaE. A.

канд.  ветеринар.  наук,  доц.  кафедры  генетических  и репродуктивных  биотехнологий

 PhD.  In  Veterinary  science,  Associate  Professor,  Department of Genetic and Reproductive Technologies

e.kora@mail.ruТрифоноваА. В.TrifonovaA. V.

канд. биол. наук, директор по науке

PhD in biological science,  the  director  of  science

ФинагеевЕ. Ю.FinageevE. Yu.

канд. ветеринар. наук, асс. кафедры  генетических  и репродуктивных  биотехнологий

PhD. In Veterinary sciences, Assistant, Department of Genetic and Reproductive  Technologies

ГлавацкаяД. Е.GlavatskayaD. E.

студ.

student

ПушкинаВ. С.PushkinaV. S.

студ.

student

ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»РоссияSt. Petersburg state academy of veterinary medicineRussian FederationООО «ЦитоГенТест»РоссияLTD CitoGenTestRussian Federation20231612202304353360Copyright © Корочкина Е.А., Трифонова А.В., Финагеев Е.Ю., Главацкая Д.Е., Пушкина В.С., 20232023Корочкина Е.А., Трифонова А.В., Финагеев Е.Ю., Главацкая Д.Е., Пушкина В.С.Korochkina E.A., Trifonova A.V., Finageev E.Y., Glavatskaya D.E., Pushkina V.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vetjournal.spbguvm.ru/jour/article/view/1194

В настоящее время искусственное осеменение, как одна из разновидностей вспомогательных репродуктивных технологий, имеет масштабное использование в молочном и мясном скотоводстве. Чего нельзя сказать о таком перспективном направлении сельскохозяйственной отрасли как козоводство.  Одним из сдерживающих факторов является негативное влияние низких температур на морфофункциональные характеристики сперматозоидов козлов-производителей. Целью настоящих исследований явилась апробация протокола криоконсервации спермы козлов-производителей с модификацией предподготовки и проведением последующей оценки качественных показателей спермы до и после ее глубокой заморозки. Была проведена комплексная оценка качества спермы (объем, концентрация,  морфология,  подвижность)  козлов  (n=10) по  общепринятым  методикам  и протоколам.  Оценка  качественных  показателей  спермы  включала  в  себя  пять  этапов: после взятия спермы, два часа после охлаждения, после оттаивания: 0 часов, 1 и 2 часа. Исходя из полученных результатов, сперматозоиды козлов-производителей имеют низкую криорезистентность. После криоконсервации (0, 1 и 2 часа после оттаивания) происходит увеличение количества сперматозоидов с повреждением хвоста на 7,5% (p≤0,05), 15,5% и 21,8% (p≤0,01), а также снижение количества прогрессивно двигающихся сперматозоидов в 1,4; 1,6 и 2,5 раз (p≤0,01) по сравнению с результатами оценки 0 часов после взятия. Использование протокола глубокой двухфазовой заморозки спермы позволяет сохранить жизнеспособность сперматозоидов с прогрессивностью движений, равной 54,2±5,1  %  и  количеством  морфологически  нормальных  сперматозоидов,  равным 64,1±1,9%. При  этом  предподготовка  спермы  к  процессу  криоконсервации  (текущий протокол) включает в себя центрифугирование (режим:7000 об/мин в течение 15 минут), удаление семенной плазмы, разбавление 1:4 (разбавитель OptiXcell), охлаждение (4 часа при  температуре  4℃); протокол  криоконсервации  спермы:  1.  погружение  гоблетов  с пайетами 4 см над жидким азотом на 7 минут; 2. полное погружение в жидкий азот.

Currently, artificial insemination, as one of the types of assisted reproductive technologies, is widely used in dairy and beef cattle breeding.  The  same  cannot  be  said  about such a promising direction in the agricultural industry as goat breeding. One of the limiting  factors  is  the  negative  impact  of  low temperature on the morphofunctional charateristics  of  sperm  of  breeding  goats.  The purpose of this research was to test a protocol of sperm cryopreservation of stud goats with  modification  of  prepreparation  and subsequent assessment of the quality indicators of sperm before and after its deep freezing. A comprehensive assessment of sperm quality (volume, concentration, morphology, motility)  of  goats  (n=10)  was  carried  out using generally accepted methods and protocols. The assessment of sperm quality indicators included five stages: after sperm collection, two hours after cooling, after thawing: 0 hours, 1 and 2 hours. According on the obtained results, the sperm of breeding goats ha low cryoresistance. After cryopreservation  (0,  1  and  2  hours  after  thawing), there is an increase in the number of sperm with tail damage by 7.5% (p≤0.05), 15.5% and 21.8% (p≤0.01), and also a decrease in the number of progressively moving sperm by 1.4; 1.6 and 2.5 times (p≤0.01) compared with  the  results  of  the  assessment  0  hours after collection. The use of a deep two-phase sperm freezing protocol allows maintaining the viability of sperm with a progression of movements equal to 54.2±5.1% and a number of morphologically normal sperm equal to  64.1±1.9%.  In  this  case,  the  prepreparation  of  sperm  for  the  cryopreservation  process  (current  protocol)  includes sperm  centrifugation  (mode:  7000  rpm  for 15  minutes),  removal  of  seminal  plasma, dilution  1:4  (OptiXcell  diluent),  cooling  (4 hours at 4℃); sperm cryopreservation protocol: 1. immersion of goblets with paillettes 4 cm above liquid nitrogen for 7 minutes; 2. complete immersion in liquid nitrogen.

спермакозлы-производителипротокол криоконсервацииискусственное осеменениеspermbreedinggoatscryopreservationprotocolartificialinsemenationРНФ № 23-26-00157 «Влияние МСК из жировой ткани и костного мозга мелких жвачных животных на качественные показатели их сперматозоидов до и после криоконсервации» (соглашение № 23-26-00157 от 13.01.2023).Russian Science Foundation №. 23-26-00157 “The influence of MSCs from adipose tissue and bone marrow of small ruminants on the quality indicators of their sperm before and after cryopreservation” (agreement №. 23-26-00157 dated 01/13/2023).ReferencesАйбазов, М. М. Качественные показатели спермы козла, сохраняемой при температуре тающего льда / М. М. Айбазов, Т. В. Мамонтова, М. С. Сеитов // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. – 2018. – № 3 (71). – С. 200-203.Aibazov, M. M. Qualitative indicators of goat sperm stored at the temperature of melting ice / M. M. Aibazov, T. V. Mamontova, M. S. Seitov // News of the Orenburg State Agrarian University. – 2018. – №. 3(71). – P. 200-203.Баженова, Н.Б. Оценка качества спермы животных / Н. Б. Баженова, К.В. Племяшов. – СПб.: «Издательство СПбГАВМ», 2007. – 22 с.Bazhenova, N.B. Assessing the quality of animal sperm / N.B. Bazhenova, K.V. Plemyashov. – St. Petersburg: “SPbGAVM Publishing House”, 2007. – 22 P.ГОСТ 32222–2013.Средства воспроизводства. Сперма. Методы отбора проб. – Веден 2015-01-27. – М.: Стандарт информ, 2018. – 10 с.GOST 32222–2013. Means of reproduction. Sperm. Sampling methods. – Veden 2015-01-27. – M.: Standard Inform, 2018. – 10 P.Корочкина, Е.А. Качество спермы баранов до и после криоконсервации / Е. А. Корочкина, Е. Ю. Финагеев, Д. Е. Главацкая, В. С. Пушкина // Ветеринария. – 2023. – № 8. – С. 34-38.Korochkina, E.A. The quality of ram sperm before and after cryopreservation / E. A. Korochkina, E. Yu. Finageev, D. E. Glavatskaya, V. S. Pushkina // Veterinary Medicine. – 2023. – No. 8. – P. 34-38.Dorado, J.Cryopreservation of goat spermatozoa: Comparison of two freezing extenders based on post-thaw sperm quality and fertility rates after artificial insemination/J. Dorado, I. Rodríguez, M. Hidalgo// Theriogenology, Vol. 68, Issue 2.-2007.-P. 168-177.Dorado, J.Cryopreservation of goat spermatozoa: Comparison of two freezing extenders based on post-thaw sperm quality and fertility rates after artificial insemination/J. Dorado, I. Rodríguez, M. Hidalgo// Theriogenology, Vol. 68, Issue 2.-2007.-P. 168-177.Evans, G. Artifical Insemination of Sheep and Goats / G. Evans, W. M. Maxwell, S. Salamon // Butterworth Pty Limited; Tennant Creek, Australia: 1987.Evans, G. Artifical Insemination of Sheep and Goats / G. Evans, W. M. Maxwell, S. Salamon // Butterworth Pty Limited; Tennant Creek, Australia: 1987.Himsikha С. Effect of Centrifugation Regime on Cryopreservation of Beetal Buck Semen / С. Himsikha, S. Sinha, D. Borpujari, B. C. Deka // Indian Journal of Animal Research. – 2023. 57(2). – P. 178183.Himsikha С. Effect of Centrifugation Regime on Cryopreservation of Beetal Buck Semen / С. Himsikha, S. Sinha, D. Borpujari, B. C. Deka // Indian Journal of Animal Research. – 2023. - 57(2). – P. 178-183.Mook, J.L. Effect of egg yolk level, washing and extended prefreeze equilibration on postthaw motility of buck semen / Mook, J.L. Wildeus, S. // Southern Section American Society of Animal Science Annual Meeting. Dallas, TX. – 2008.Mook, J.L. Effect of egg yolk level, washing and extended prefreeze equilibration on postthaw motility of buck semen / Mook, J.L. Wildeus, S. // Southern Section American Society of Animal Science Annual Meeting. Dallas, TX. – 2008.Treulen F. Impactofpost-thawsupplementationofsemenextender-withantioxidantsonthequalityandfunctionvari ablesofstallionspermatozoa / F. Treulen, L. Agulia, M.E. Arias, I A. Jofre, R. Felmer // Animal Reproduction Science. - 2019, Vol. 201. - P.71-83.Treulen F. Impactofpost-thawsupplementationofsemenextender-withantioxidantsonthequalityandfunctionvari ablesofstallionspermatozoa / F. Treulen, L. Agulia, M.E. Arias, I A. Jofre, R. Felmer // Animal Reproduction Science. - 2019, Vol. 201. - P.71-83.Xu, B. Evaluation of lipidomic change in goat sperm after cryopreservation / Xu B., Wang R., Wang Z., Liu H. et. al. // Front Vet Sci.-2022. P. 1-11.Xu, B. Evaluation of lipidomic change in goat sperm after cryopreservation / Xu B., Wang R., Wang Z., Liu H. et. al. // Front Vet Sci.-2022. P. 1-11.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.