ivmМеждународный вестник ветеринарииInternational Journal of Veterinary Medicine2072-2419SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2072-2419.2024.4.501ivm-1560Research ArticleАКУШЕРСТВО, ГИНЕКОЛОГИЯOBSTETRICS, GYNECOLOGYПрактическое использование модели хориоаллантоисной мембраны (хам) при создании криобанка генеративных клеток самок Gallus gallus domecticusPRACTICAL USE OF THE CHORIOALLANTOIC MEMBRANE (CAM) MODEL IN THE CREATION OF A CRYOBANK OF GENERATIVE CELLS OF FEMALE GALLUS GALLUS DOMECTICUShttps://orcid.org/0000-0001-9504-3916СтанишевскаяО. И.StanishevskayaO. I.

Станишевская О.И. – д-р биол. наук, гл. науч. сотр., зав. лабораторией генетики, разведения и сохранения генетических ресурсов сельскохозяйственных птиц

Stanishevskaya O.I. – Doctor (Biology), Chief, head. laboratory of Genetics, breeding and conservation of genetic resources of farm birds

olgastan@list.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1905-6373СилюковаЮ. Л.SilyukovaY. L.

Силюкова Ю.Л. – мл. науч. сотр. лаборатории генетики, разведения и сохранения генетических ресурсов сельскохозяйственных птиц 

Silyukova Y.L. – PhD (Biology), researcher laboratories of genetics, breeding and conservation of genetic resources of farm birds 

МирзакаеваИ. И.MirzakaevaI. I.

Мирзакаева И.И. – лаборант-исследователь лаборатории генетики, разведения и сохранения генетических ресурсов сельскохозяйственных птиц 

Mirzakaeva I.I. – laboratory assistant researcher at the Laboratory of Genetics, breeding and conservation of genetic resources of farm birds

Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный исследовательский центр животноводства – ВИЖ имени академика Л. К. Эрнста»РоссияThe All-Russian Scientific Research Institute of Genetics and Breeding of Farm Animals is a branch of the Federal State Budgetary Scientific Institution "Federal Research Center for Animal Husbandry – VIZ named after Academician L. K. Ernst"Russian Federation20242001202504501508Copyright © Станишевская О.И., Силюкова Ю.Л., Мирзакаева И.И., 20242024Станишевская О.И., Силюкова Ю.Л., Мирзакаева И.И.Stanishevskaya O.I., Silyukova Y.L., Mirzakaeva I.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vetjournal.spbguvm.ru/jour/article/view/1560

Одним из перспективных направлений сохранения женских репродуктивных клеток класса птиц (Aves) является использование эмбриональных тканей репродуктивных органов и клеток. Оценка эффективности методов замораживания тканей женских репродуктивных органов птиц должна основываться на простоте и доступности. Модель хориоаллантоисной мембраны кур (ХАМ) может быть доступным эффективным подходом при оценке качества заморожено/оттаянных тканей яичников птиц для последующей ортотопной трансплантации. Целью исследования было определить возраст эмбрионов кур для получения дифференцированных по полу гонад и провести оценку жизнеспособности трансплантированных эмбриональных женских гонад на хориоаллантоисной мембране по их неоваскуляризации в мезенхиме для использования в дальнейшем данных методов скрининга при криоконсервации эмбриональных женских гамет кур. Для получения эмбриональных женских гонад использовали оплодотворенные яйца кур породы русская белая после инкубации в течение 9-и суток – 10 шт., и в течение 17-и суток – 10 шт. (в 3х повторностях). Количество васкуляризированных донорских гонад после трансплантации на ХАМ реципиента от эмбрионов в возрасте 9-и суток составило 75,0% от общего числа трансплантатов; от эмбрионов в возрасте 17-и суток этот показатель составил 63,6%. Представленные данные предназначены для практической оценки модели трансплантации ткани эмбриональных яичников доноров с использованием ХАМ реципиента с целью последующего ее использования при оценке эффективности протокола витрификации эмбриональных тканей гонад кур, а также в протоколе получения гонадных зародышевых клеток (GGCs) из эмбриональных тканей яичников кур от 9- суточных эмбрионов и трансплантации тканей эмбриональных яичников от 17-суточных эмбрионов.

One of the promising areas for preserving female reproductive cells of the Aves class is the use of embryonic tissues of reproductive organs and cells. Evaluation of the effectiveness of freezing methods for female reproductive organs of birds should be based on simplicity and availability. The chicken chorioallantoic membrane (CAM) model can be an accessible and effective approach to assessing the quality of frozen/ thawed avian ovarian tissues for subsequent orthotopic transplantation. The aim of the study was to determine the age of chicken embryos for obtaining sex-differentiated gonads and to evaluate the viability of transplanted embryonic female gonads on the chorioallantoic membrane by their neovascularization in the mesenchyme for further use of these screening methods in cryopreservation of embryonic female gametes of chickens. To obtain embryonic female gonads, fertilized eggs of Russian White chickens were used after incubation for 9 days - 10 pcs, and for 17 days - 10 pcs (in 3 replicates). The number of vascularized donor gonads after transplantation to the recipient's CAM from 9-day-old embryos was 75.0% of the total number of transplants; from 17-dayold embryos it was 63.6%. The presented data are intended for practical evaluation of the model of transplantation of donor embryonic ovarian tissue using the recipient's CAM for the purpose of its subsequent use in assessing the effectiveness of the vitrification protocol for embryonic gonadal tissues of chickens, as well as in the protocol for obtaining gonadal germ cells (GGCs) from embryonic ovarian tissues of chickens from 9-day-old embryos and transplantation of embryonic ovarian tissues from 17-day-old-embryos

хориоаллантоисная мембрана курэмбрионыгонадыяичники куртрансплантацияchicken chorioallantoic membraneembryosgonadschicken ovariestransplantationНастоящее исследование проведено по теме НИР 124020200127-7 «Изучение молекулярно-биологических основ формирования воспроизводительных функций и совершенствование биотехнологий, направленных на повышение и эффективное использование репродуктивного потенциала сельскохозяйственных животных»This study was conducted under the research topic 124020200127-7 “Study of the molecular biological foundations of the formation of reproductive functions and improvement of biotechnologies aimed at increasing and effectively using the reproductive potential of farm animals”ReferencesSun, Y. Poultry genetic heritage cryopreservation and reconstruction: advancement and future challenges / Sun Y., Li, Y., Zong, Y. et al // J Animal Sci Biotechnol. 2022. – Vol. 13. – P. 115. doi:10.1186/s40104-022-00768-2Sun, Y. Poultry genetic heritage cryopreservation and reconstruction: advancement and future challenges / Sun Y., Li, Y., Zong, Y. et al // J Animal Sci Biotechnol. 2022. – Vol. 13. – P. 115. doi:10.1186/s40104-022-00768-Song, Y. Offspring produced from orthotopic transplantation of chicken ovaries / Song Y., Silversides F.G. // Poult Sci. 2007. – Vol. 86(1). – P. 107-111. doi: 10.1093/ps/86.1.107.Song, Y. Offspring produced from orthotopic transplantation of chicken ovaries / Song Y., Silversides F.G. // Poult Sci. 2007. – Vol. 86(1). – P. 107-111. doi: 10.1093/ps/86.1.107.Fujihara, M. Cryopreservation Competence of Chicken Oocytes as a Model of Endangered Wild Birds: Effects of Storage Time and Temperature on the Ovarian Follicle Survival / Fujihara M., Shiraishi J.-i., Onuma M., et al. // Animals. 2022. – Vol. 12. P. 1434. doi:10.3390/ani12111434Fujihara, M. Cryopreservation Competence of Chicken Oocytes as a Model of Endangered Wild Birds: Effects of Storage Time and Temperature on the Ovarian Follicle Survival / Fujihara M., Shiraishi J.-i., Onuma M., et al. // Animals. 2022. – Vol. 12. P. 1434. doi:10.3390/ani12111434Song, Y. The Technique of Orthotopic Ovarian Transplantation in the Chicken / Song Y., Silversides F. // – Poultry science. – 2006. – Vol. 85 – P. 1104-1006. Doi: 10.1093/ps/85.6.1104Song, Y. The Technique of Orthotopic Ovarian Transplantation in the Chicken / Song Y., Silversides F. // – Poultry science. – 2006. – Vol. 85 – P. 1104-1006. Doi: 10.1093/ps/85.6.1104Hossay, C. The Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Model as a Tool to Study Ovarian Tissue Transplantation / Hossay C., Cacciottola L., Storder S., et al. // J Vis Exp. 2023. – Vol. 23(196). doi: 10.3791/64867.Hossay, C. The Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Model as a Tool to Study Ovarian Tissue Transplantation / Hossay C., Cacciottola L., Storder S., et al. // J Vis Exp. 2023. – Vol. 23(196). doi: 10.3791/64867.Pink, D. Parseghian MH. High efficacy vasopermeability drug candidates identified by screening in an ex ovo chorioallantoic membrane model / Pink D., Luhrs K.A., Zhou L., et. al. // Sci Rep. 2015. – Vol. 29 (5). – P. 15756. doi: 10.1038/srep15756.Pink, D. Parseghian MH. High efficacy vasopermeability drug candidates identified by screening in an ex ovo chorioallantoic membrane model / Pink D., Luhrs K.A., Zhou L., et. al. // Sci Rep. 2015. – Vol. 29 (5). – P. 15756. doi: 10.1038/srep15756.Хохлов, Р. Ю. Особенности морфологической дифференцировки яичника кур в онтогенезе / Р. Ю. Хохлов // Нива Поволжья. – 2009. – № 2(11). – С. 94-98.;Hohlov, R. Yu. Osobennosti morfologicheskoj differencirovki yaichnika kur v ontogeneze / R. Yu. Hohlov // Niva Povolzh'ya. – 2009. – № 2(11). – S. 94-98.;Хохлов, Р. Ю. Морфогенез яичника куриного эмбриона в зародышевом периоде эмбрионального онтогенеза / Р. Ю. Хохлов, С. И. Кузнецов // Международный вестник ветеринарии. 2022. – № 4. – С. 353-356. – DOI 10.52419/issn2072-2419.2022.4.353.)Khokhlov R.Y., Kuznetsov S.I. Morphogenesis of the ovary of a chicken embryo in the germinal period of embryonic ontogenesis. International Journal of Veterinary Medicine. 2022;(4):353-356. (In doi.org/10.52419/issn2072-2419.2022.4.353Альфа-фетопротеин / В. А. Черешнев [и др.] ; Рос. акад. наук, Ур. отд-ние, Ин-т иммунологии и физиологии УрО РАН, Перм. гос. мед. акад. МЗ РФ, ЗАО "Ин-т новых мед. технологий" ; [отв. ред. Н. Н. Кеворков]. – Екатеринбург: УрО РАН, 2004. – 375 с.Al'fa-fetoprotein / V. A. Chereshnev [i dr.] ; Ros. akad. nauk, Ur. otd-nie, In-t immunologii i fiziologii UrO RAN, Perm. gos. med. akad. MZ RF, ZAO "In-t novyh med. tekhnologij" ; [otv. red. N. N. Kevorkov]. – Ekaterinburg: UrO RAN, 2004. – 375 s.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.