ivmМеждународный вестник ветеринарииInternational Journal of Veterinary Medicine2072-2419SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2072-2419.2024.4.539ivm-1564Research ArticleАКУШЕРСТВО, ГИНЕКОЛОГИЯOBSTETRICS, GYNECOLOGYПереживаемость спермы жеребцов в разных разбавителях при охлаждении до 4-5°CSTALLION SPERM SURVIVAL IN VARIOUS EXTENDERS WHEN COOLING AT 4-5°Chttps://orcid.org/0000-0002-8496-5277НикиткинаЕ. В.NikitkinaE. V.

Никиткина Е.В. – канд. биол. наук., лаборатория биологии развития 

Nikitkina E.V. – Ph.D. biological sciences, laboratory of developmental biology 

nikitkinae@mail.ruВсероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения сельскохозяйственных животных – филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный исследовательский центр животноводства – ВИЖ имени академика Л. К. Эрнста»РоссияRussian Research Institute of Farm Animal Genetics and Breeding — Branch of the L.K. Ernst Federal Research Center for Animal HusbandryRussian Federation20242001202504539546Copyright © Никиткина Е.В., 20242024Никиткина Е.В.Nikitkina E.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vetjournal.spbguvm.ru/jour/article/view/1564

60 процентов искусственных осеменений лошадей в мире проводится с использованием охлажденной спермы, так как ее оплодотворяющая способность выше, чем криоконсервированной (источники). Однако, время хранения охлажденной спермы ограничено несколькими часами (источники). Использование разбавителей продлевает сохранность биологической полноценности спермы в охлажденном виде (источники). В проведенном исследовании оценивалась переживаемость и морфология охлажденной спермы жеребцов при использовании 4 разбавителей: ЛХЦЖ, рекомендованного ВНИИ коневодства; Кении, применяемый за рубежом; разбавитель для охлаждения спермы ВНИИГРЖ; опытный, на основе ТРИС и фруктозы. В результате обнаружена достоверная разница показателей общей и прогрессивной подвижности спермы, разбавленной опытной и остальными средами при хранении 24, 48 (Р˂0,05) и 72 часа (Р˂0,01). После хранения в течении 72 часов сперма, разбавленная опытным разбавителем, имела общую подвижность в среднем выше 50%, а прогрессивную 48,2±3,67%, (тогда как ГОСТ имеет следующие показатели: ХХХХХХ), что позволяет использовать ее для искусственного осеменения. Оценка морфологии сперматозоидов показала сохранность спермиев при хранении 72 часов охлажденном виде при использовании 4-х разбавителей. Результаты исследования показали, что возможно сохранение показателей качества спермы необходимых для искусственного осеменения с применением существующих разбавителей в течении 48 часов, а при разбавлении опытным разбавителем в течении 72 часов.

Most equine artificial insemination is now carried out using chilled semen, as its fertilizing capacity is higher than cryopreserved semen. However, the possibility of long-term storage of chilled sperm is limited. The use of extenders allows to prolong the preservation of the biological value of chilled sperm. In this study, the survival rate and morphology of chilled stallion sperm were assessed using different extenders. Four extenders were used: LHСZh, recommended by the All-Russian Research Institute of Horse Breeding, Kenny, widely used abroad, extender for cooling sperm of the All -Russian Research Institute of Farm Animal Genetics and Breeding, and an experimental extender based on TRIS and fructose. A reliable difference was observed in the total and progressive motility of sperm diluted with the experimental and other media during storage for 24, 48 (P˂0.05) and 72 hours (P˂0.01). After storage for 72 hours, sperm diluted with the experimental extender had an average total motility over 50% and a progressive motility 48.2±3.67%, which makes it possible to use it for artificial insemination. Evaluation of sperm morphology showed good preservation of cells during 72-hour storage at 4-5 0C when using all extenders. The results of this study showed preservation of sperm quality necessary for artificial insemination for 48 hours, and when diluted with the experimental extender for 72 hours.

спермажеребцыразбавителипрогрессивная подвижностьакросомыsemenstallionsextendersprogressive motilityacrosomesРабота выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки, проект № 124020200127-7The work was carried out with the financial support of the Ministry of Education and Science, project No. 124020200127-7ReferencesHenry, A.M.S. Factors associated with successful homologous artificial insemination / A.M.S.Henry, O.E. Raphael, and A.M.M Carmen //Gynecol. Reprod. Health. - 2019. - № 3(2). – C. 1-5. www.scivisionpub.com/pdfs/factorsassociated-to-successful-homologousartificial-insemination-682.pdfHenry, A.M.S. Factors associated with successful homologous artificial insemination / A.M.S.Henry, O.E. Raphael, and A.M.M Carmen //Gynecol. Reprod. Health.2019: 3(2):1-5. www.scivisionpub.com/pdfs/factorsassociated-to-successful-homologousartificial-insemination-682.pdfBustani, G.S. Semen extenders: An evaluative overview of preservative mechanisms of semen and semen extenders / G.S. Bustani, F.H. Baiee // Veterinary World. – 2021. - № 14(5). – C.1220-1233. www.doi.org/10.14202/vetworld.2021.1220-1233Bustani, G.S. Semen extenders: An evaluative overview of preservative mechanisms of semen and semen extenders / G.S. Bustani, F.H. Baiee // Veterinary World. 2021:14 (5):1220-1233. www.doi.org/10.14202/vetworld.2021.1220-1233Kowalczyk, A. Factors Influencing the Popularity of Artificial Insemination of Mares in Europe / A. Kowalczyk, E. Czerniawska-Piątkowska, M. Kuczaj // Animals. - 2019. - №9. -C. 460. https://doi.org/10.3390/ani9070460Kowalczyk, A. Factors Influencing the Popularity of Artificial Insemination of Mares in Europe / A. Kowalczyk, E. Czerniawska-Piątkowska, M. Kuczaj // Animals. 2019:9:460. https://doi.org/10.3390/ani9070460Liu, C.H. Effects of pH during liquid storage of goat semen on sperm viability and fertilizing potential / C.H. Liu, H.B Dong, D.L Ma, Y.W. Li, D. Han, M.J. Luo, J.H. Tan //Anim. Reprod. Sci. – 2016. - № 164 (1). – С. 47-56. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2015.11.011Liu, C.H. Effects of pH during liquid storage of goat semen on sperm viability and fertilizing potential / C.H. Liu, H.B Dong, D.L Ma, Y.W. Li, D. Han, M.J. Luo, J.H. Tan //Anim. Reprod. Sci. 2016:164(1):47-56. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2015.11.011Mousavi, S.M. Comparison of two different antioxidants in a nano lecithin-based extender for bull sperm cryopreservation / S.M. Mousavi, A. Towhidi, M. Zhandi, G. Amoabediny, A. MohammadiSangcheshmeh, M.Sharafi, S.M.H. Hussaini // Anim. Reprod. Sci. – 2019. - № 209(10). – C.106171. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2019.106171Mousavi, S.M. Comparison of two different antioxidants in a nano lecithin-based extender for bull sperm cryopreservation / S.M. Mousavi, A. Towhidi, M. Zhandi, G. Amoabediny, A. MohammadiSangcheshmeh, M.Sharafi, S.M.H. Hussaini // Anim. Reprod. Sci. 2019:209 (10):106171. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2019.106171Mohamed, M.Y. Influence of adding different energy sources to the bull and ram spermatozoa exposed to different refrigerating times / M.Y. Mohamed, A.M. Abd ElHafeez, A.M. Shaarawy // Egypt. J. Sheep Goats Sci. – 2019. - № 14(2). – C. 1-18Mohamed, M.Y. Influence of adding different energy sources to the bull and ram spermatozoa exposed to different refrigerating times / M.Y. Mohamed, A.M. Abd ElHafeez, A.M. Shaarawy // Egypt. J. Sheep Goats Sci. 2019:14(2):1-18Schulze, M. Antibiotics and their alternatives in artificial breeding in livestock / M. Schulze, E. Nitsche-Melkus, B. Hensel, M. Jung, U. Jakop // Anim. Reprod. Sci. – 2020. - № 220(9). – С. 106284. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2020.106284Schulze, M. Antibiotics and their alternatives in artificial breeding in livestock / M. Schulze, E. Nitsche-Melkus, B. Hensel, M. Jung, U. Jakop // Anim. Reprod. Sci.2020: 220(9):106284. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2020.106284Hameed, N. Effects of different extenders, storage temperatures, and antioxidant supplementation on chilled semen quality: a review / N. Hameed, S. Akhter, J.M.G. Souza-Fabjan, M. Zubair, M. Irfan-Ur-Rehman Khan // Trop Anim Health Prod. – 2024. - № 56(2). – С.85. doi: 10.1007/s11250-024-03930-2. PMID: 38386220.Hameed, N. Effects of different extenders, storage temperatures, and antioxidant supplementation on chilled semen quality: a review / N. Hameed, S. Akhter, J.M.G. Souza-Fabjan, M. Zubair, M. Irfan-Ur-Rehman Khan // Trop Anim Health Prod. 2024:56 (2):85. doi: 10.1007/s11250-024-03930-2. PMID: 38386220.Filho, I.C.B. Skim milk-egg yolk-based semen extender compensates for nonenzymatic antioxidant activity loss during equine semen cryopreservation / I.C.B. Filho, C.D. Pederzolli, A.M. Sgaravatti, R.M Gregory, C.S.D. Filho, M.I.M. Jobim, R.C. Mattos // Anim. Reprod. – 2018. - № 6(2). – С. 392-399.Filho, I.C.B. Skim milk-egg yolk based semen extender compensates for nonenzymatic antioxidant activity loss during equine semen cryopreservation / I.C.B. Filho, C.D. Pederzolli, A.M. Sgaravatti, R.M Gregory, C.S.D. Filho, M.I.M. Jobim, R.C. Mattos // Anim. Reprod. 2018:6(2): 392-399.Neuhauser, S. Comparison of the effects of five semen extenders on the quality of frozen-thawed equine epididymal sperm / S. Neuhauser, H. Bollwein, M. Siuda, J. Handler // J. Equine Vet. Sci. – 2019. - № 79(8). – C. 1-8. https://doi.org/10.1016/j.jevs.2019.05.002Neuhauser, S. Comparison of the effects of five semen extenders on the quality of frozen-thawed equine epididymal sperm / S. Neuhauser, H. Bollwein, M. Siuda, J. Handler // J. Equine Vet. Sci. 2019:79(8):1-8. https://doi.org/10.1016/j.jevs.2019.05.002Никиткина Е.В. Разбавитель (среда) ВНИИГРЖ для хранения спермы жеребцов при 4-5оС Патент на изобретение RU 2610554 C, 13.02.2017. Заявка № 2015149452 от 17.11.2015.Nikitkina E.V. Extender (medium) VNIIGRZH for storing stallion sperm at 4-5 °C Patent for invention RU 2610554 C, 13.02.2017. Application No. 2015149452 dated 17.11.2015.Batellier, F. Advances in cooled semen technology /F. Batellier, M. Vidament, J. Fauquant, G. Duchamp, G. Arnaud, J.M. Yvon, M. Magistrini // Animal Reproduction Science. – 2001. - № 68 (3–4). – С.181-190. https://doi.org/10.1016/S0378-4320(01)00155-5.Batellier, F. Advances in cooled semen technology /F. Batellier, M. Vidament, J. Fauquant, G. Duchamp, G. Arnaud, J.M. Yvon, M. Magistrini // Animal Reproduction Science. 2001:68 (3–4):181-190. https://doi.org/10.1016/S0378-4320(01)00155-5.Batellier, F. Effect of milk fractions on survival of equine spermatozoa. / F. Batellier, M. Magistrini, J. Fauquant, E. Palmer // Theriogenology. – 1997. - № 48 (3). – С. 391-410. https://doi.org/10.1016/S0093-691X(97)00250-1.Batellier, F. Effect of milk fractions on survival of equine spermatozoa. / F. Batellier, M. Magistrini, J. Fauquant, E. Palmer // Theriogenology. 1997:48 (3):391-410. https://doi.org/10.1016/S0093-691X(97)00250-1.du Plessis, S.S. Oxidative phosphorylation versus glycolysis: What fuel do spermatozoa use? / S.S. du Plessis, A. Agarwal, G. Mohanty, M.Van der Linde // Asian J. Androl. – 2015. - №17(2). – С.230-235. doi: 10.4103/1008-682X.135123.du Plessis, S.S. Oxidative phosphorylation versus glycolysis: What fuel do spermatozoa use? / S.S. du Plessis, A. Agarwal, G. Mohanty, M.Van der Linde // Asian J. Androl. 2015:17(2):230-235. doi: 10.4103/1008-682X.135123.Nikitkina, E. Assessment of Semen Respiratory Activity of Domesticated Species before and after Cryopreservation: Boars, Bulls, Stallions, Reindeers and Roosters / E. Nikitkina, I. Shapiev, A. Musidray, A. Krutikova, K. Plemyashov, S. Bogdanova, V. Leibova, G. Shiryaev, J. Turlova // Vet. Sci. – 2022. - № 9. – C.513. https://doi.org/10.3390/vetsci9100513Nikitkina, E. Assessment of Semen Respiratory Activity of Domesticated Species before and after Cryopreservation: Boars, Bulls, Stallions, Reindeers and Roosters / E. Nikitkina, I. Shapiev, A. Musidray, A. Krutikova, K. Plemyashov, S. Bogdanova, V. Leibova, G. Shiryaev, J. Turlova // Vet. Sci. 2022:9:513. https://doi.org/10.3390/vetsci9100513Cantanhêde, L.F. Use of alternative extender added of fructose aiming the cryopreservation of boar semen / L.F. Cantanhêde, E.N. de Freitas, T.B. Barros, D.B. Guimarães, A.V. Dias, R. Toniolli // Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci. – 2018. - №55(1) – С.1 -10. https://doi.org/10.11606/issn.1678-4456.bjvras.2018.115739Cantanhêde, L.F. Use of alternative extender added of fructose aiming the cryopreservation of boar semen / L.F. Cantanhêde, E.N. de Freitas, T.B. Barros, D.B. Guimarães, A.V. Dias, R. Toniolli // Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci. 2018:55:1-10. https://doi.org/10.11606/issn.1678-4456.bjvras.2018.115739Атрощенко М.М., Калашников В.В., Брагина Е.Е., Зайцев А.М. Сравнительное изучение ультраструктуры сперматозоидов в эпидидимальной, эякулированной и криоконсервированной сперме жеребцов / М.М. Атрощенко, В.В. Калашников, Е.Е Брагина, А.М. Зайцев// Сельскохозяйственная биология. - 2017. - Т. 52. - № 2. - С. 274-281. https://doi.org/10.15389/agrobiology.2017.2.274rusAtroschenko M.M., Kalashnikov V.V., Bragina E.E., Zaitsev A.M. Comparative study of sperm ultrastructure in epididymal, ejaculated and cryopreserved sperm of stallions / M.M. Atroschenko, V.V. Kalashnikov, E.E. Bragina, A.M. Zaitsev // Agricultural biology. 2017: 52:2:274-281. https://doi.org/10.15389/agrobiology.2017.2.274eng

The authors declare that there are no conflicts of interest present.