ivmМеждународный вестник ветеринарииInternational Journal of Veterinary Medicine2072-2419SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2072-2419.2025.2.46ivm-1685Research ArticleИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИINFECTIOUS DISEASESОценка безопасности и безвредности рекомбинантного кандидатного штамма для профилактики высокопатогенного гриппа птиц H5N1Assessment of the safety and harmlessness of a recombinant candidate strain for the prevention of highly pathogenic H5N1 avian influenzahttps://orcid.org/0000-0002-6474-9171ТарлавинН. В.TarlavinN. V.

канд. ветеринар. наук, асс. каф. эпизоотологии им. В.П. Урбана

Candidate of veterinary sciences, Senior lecturer of the Department of Epizootology named after V.P. Urban

tarlav1995@bk.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9648-2259ВеретенниковВ. В.VeretennikovV. V.

Senior lecturer of the Department of Epizootology named after V.P. Urban

https://orcid.org/0000-0002-1589-6300ДжавадовЭ. Д.JavadovE. J.

Doctor of Historical Sciences, Professor of the Department of Epizootology named after V.P. Urbana

https://orcid.org/0000-0003-0411-9896СергееваМ. В.SergeevaM. V.

канд. биол. наук, вед. науч. сотр. лаборатории векторных вакцин ,

Candidate of Biological Sciences, Leading Researcher at the Laboratory of Vector Vaccines

КудряК. С.KudryaK. S.

лаборант-исследователь

Laboratory researcher

https://orcid.org/0000-0002-2362-2641КрасковД. А.KraskovD. A.

асп. каф. эпизоотологии им. В.П. Урбана

postgraduate student of the Department of Epizootology named after V.P. Urban

https://orcid.org/0009-0003-1063-1690ЯковлеваА. С.YakovlevaA. S.

студ. 5 курса ФВМ

5th year student

https://orcid.org/0009-0009-6912-2413ГорбаковМ. Е.GorbakovM. E.

студ. 4 курса ФВМ

4th year student

https://orcid.org/0009-0004-1478-8705КалиматоваА. А.KalimatovaA. A.

студ. 4 курса ФВМ

4th year student 

https://orcid.org/0009-0008-3517-3776ХрипунковаД. С.KhripunkovaD. S.

студент 4 курса ФВМ

4th year student 

ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»РоссияFSBEI HE SPbSUVMRussian FederationФГБУ «НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева»РоссияSmorodintsev Influenza Research InstituteRussian Federation202501082025024653Copyright © Тарлавин Н.В., Веретенников В.В., Джавадов Э.Д., Сергеева М.В., Кудря К.С., Красков Д.А., Яковлева А.С., Горбаков М.Е., Калиматова А.А., Хрипункова Д.С., 20252025Тарлавин Н.В., Веретенников В.В., Джавадов Э.Д., Сергеева М.В., Кудря К.С., Красков Д.А., Яковлева А.С., Горбаков М.Е., Калиматова А.А., Хрипункова Д.С.Tarlavin N.V., Veretennikov V.V., Javadov E.J., Sergeeva M.V., Kudrya K.S., Kraskov D.A., Yakovleva A.S., Gorbakov M.E., Kalimatova A.A., Khripunkova D.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vetjournal.spbguvm.ru/jour/article/view/1685

В рамках работ по гранту РНФ № 24-76-10044 был получен кандидатный вакцинный штамм вируса гриппа птиц A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1), обладающий низковирулентным фенотипом вследствие замены сайта расщепления гемагглютинина.В статье представлены результаты исследований безопасности и безвредности рекомбинантного штамма вируса гриппа птиц A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1). У эмбрионов, инфицированных рекомбинантным вирусом, не наблюдались геморрагии и повреждения. Полученные данные свидетельствуют о безопасности вируса A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1) для куриных эмбрионов. Изучение безвредности проводили при внутрибрюшинном введении белым мышам неинактивированного вируса (данная группа также служила контролем для инактивированных препаратов), и при введении вируса, инактивированного формалином, бетапропиолактоном и смесью теотропина и мертиолята. Значительной потери веса ни в одной из наблюдаемых групп не было обнаружено, что свидетельствует о безвредности штамма A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 для белых беспородных мышей, а также хорошей переносимости препаратов, полученных с применением всех исследованных схем инактивации. Безвредность инактивированной вакцины, изготовленной на основе изучаемого штамма вируса с добавлением гидроксида алюминия в качестве адъюванта, проверяли путем изучения изменения живой массы суточных цыплят кросса Декалб Уайт. Во всех 3-х исследуемых группах полностью отсутствовали следы истощения, интоксикации, а также следы проявления болезни, что говорит о полной инактивации и безвредности вируса. Оценка безвредности вакцины также была проведена на десяти 150-дневных курах кросса Доминант. После введения 10-кратной прививной дозы в грудную мышцу за птицами наблюдали в течение 28 сут. Все куры в течение указанного времени остались живыми, без видимых клинических признаков переболевания и в месте введения вакцины отсутствовали следы воспалительной реакции. Можно сделать вывод, что штамм A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1) безопасен, а инактивированные вакцины, изготовленные из данного штамма, полностью безвредны.

Within the framework of the Russian Science Foundation Grant No. 24-76-10044, a candidate vaccine strain of avian influenza virus A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1) was obtained, which has a low-virulent phenotype due to replacement of the hemagglutinin cleavage site. This virus does not cause the death of developing chicken embryos during incubation and the clinical manifestation of the disease in animals upon infection. The article presents the results of studies on the safety and harmlessness of a recombinant strain of avian influenza virus A/ Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1). No hemorrhages or lesions were observed in embryos infected with the live recombinant virus. The data obtained indicate the safety of the A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 virus for embryonated chicken eggs. The study of harmlessness was carried out with intraperitoneal administration of an inactivated virus to white mice (this group also served as a control for inactivated drugs), and with the introduction of a virus inactivated with formalin, betapropiolactone and a mixture of theotropin and merthiolate. No significant weight loss was found in any of the observed groups, which indicates the harmlessness of the A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20strain for white outbred mice, as well as the good tolerability of drugs obtained using all the studied inactivation schemes. The harmlessness of an inactivated vaccine made from the inactivated virus strain with the addition of aluminum hydroxide as an adjuvant was tested by studying changes in the live weight of one-day-old Dekalb White cross chickens. In all study groups, there were no signs of exhaustion, intoxication, or signs of disease, which indicates complete inactivation and harmlessness of the virus. An assessment of the vaccine's harmlessness was also carried out on ten 150-day-old Dominant chickens. After a 10-fold inoculation dose was injected into the pectoral muscle, the birds were monitored for 28 days. All chickens remained alive during the specified time, with no visible clinical signs of illness, and there were no signs of an inflammatory reaction at the injection site. Thus, it can be concluded that the A/Syktyvkar/PR8/6:2/HA20 (H5N1) strain is safe, and inactivated vaccines made from this strain are completely harmless.

высокопатогенный грипп птицH5N1обратная генетикарекомбинантные вакциныбезвредность вакцинбезопасность вирусовhighly pathogenic avian influenzaH5N1reverse geneticsrecombinant vaccinesvaccine safetyvirus safetyИсследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 24-76-10044, https://rscf.ru/project/24-76-10044»ReferencesБорисов А.В. ФГУ «ВГНКИ» ВНИИЗЖ. Вакцина против гриппа птиц инактивированная эмульсионная. Патент № RU2323741C2. Россия, 2006 г.2Borisov A.V. FGU "VGNKI" VNIIZH. Avian influenza vaccine is an inactivated emulsion vaccine. Patent No. RU2323741C2. Russia, 20062Джавадов Э.Д., Дмитриева М.Е. Грипп птиц. СПб, 2011.Javadov E.D., Dmitrieva M.E. Avian influenza. St. Petersburg, 2011.Джавадов Э.Д., Хохлачев О.Ф., Новикова О.Б. [и др.] Изучение эффективности препарата Теотропин р+ в отношении основных возбудителей бактериальных болезней птиц. Международный вестник ветеринарии, 2020, 3: 76-82 (doi: 10.17238/issn2072-2419.2020.3.76).Javadov E.D., Khokhlachev O.F., Novikova O.B. [et al.] Study of the effectiveness of the drug Theotropin R+ against the main pathogens of bacterial diseases of birds. International Bulletin of America, 2020, 3:76- 82 (doi:10.17238/issn2072-2419.2020.3.76).Киселев О.И., Цыбалова Л.М., Покровский В.И. Состояние разработки вакцин против вируса гриппа H5N1 в мире и России. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2006 (5): 28– 38.Kiselev O.I., Kibalova L.M., Pokrovsky V.I. The state of development of a vaccine against the H5N1 influenza virus in the world and Russia. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunology. 2006 (5): 28-38.Тарлавин Н.В., Веретенников В.В., Джавадов Э.Д. [и др.]. Сравнительный анализ кодирующих последовательностей пятого и седьмого сегмента генома вируса гриппа А подтипов H5N1, H7N9, H9N2. Ветеринария Кубани, 2023, 4: 3-5 (doi: 10.33861/2071-8020-2023-4-3-5).Tarlavin N.V., Veretennikov V.V., Javadov V.D. [et al.]. The government department coordinating the activities of this and other segments of the genome of influenza viruses is a variety of H5N1, H7N9, H9N2. Catherine Kuban, 2023, 4:3-5 (doi: 10.33861/2071-8020-2023-4-3-5).Charostad J., Rukerd M.R.Z., Mahmoudvand S., Bashash D., Hashemi S.M.A., Nakhaie M., Zandi K. A comprehensive review of highly pathogenic avian influenza (HPAI) H5N1: An imminent threat at doorstep. Travel medicine and infectious disease. 2023 - Vol. 55.Charostad J., Rukerd M.R.Z., Mahmudvand S., Bashash D., Hashemi S.M.A., Nahai M., Zandi K. Comprehensive overview of highly pathogenic avian influenza (HPAI) H5N1: an immediate threat at hand. Travel medicine and infectious diseases. 2023 - Volume 55.Cui P., Shi J., Wang C., Zhang Y., Xing X., Kong H., Yan C., Zeng X., Liu L., Tian G., Li C., Deng G., Chen H. Global dissemination of H5N1 influenza viruses bearing the clade 2.3.4.4b HA gene and biologic analysis of the ones detected in China. Emerging microbes and infections, 2022, 11(1): 1693- 1704 (doi: 10.1080/22221751.2022.2088407).Cui P., Shi J., Wang S., Zhang Y., Xing H., Kong H., Yang S., Zeng H., Liu L., Tian G., Li S., Deng G., Chen H. Global spread of H5N1 influenza viruses carrying the HA gene of clade 2.3.4.4b, and biological analysis of the detected viruses. in China. Emerging germs and infections, 2022, 11(1): 1693- 1704 ( doi: 10.1080/22221751.2022.2088407).Neumann G, Ozawa M, Kawaoka Y. Reverse genetics of influenza viruses. Methods in molecular biology, 2012, 865: 193- 206 (doi: 10.1007/978-1-61779-621-0_12).Neiman G., Ozawa M., Kawaoka Y. Reverse genetics of influenza viruses. Methods in Molecular Biology, 2012, 865:193-206 (doi: 10.1007/978-1-61779-621-0_12).Zinyakov, N.; Andriyasov, A.; Zhestkov, P.; Kozlov, A.; Nikonova, Z.; Ovchinnikova, E.; Grekhneva, A.; Shcherbakova, L.; Andreychuk, D.; Sprygin, A.; et al. Analysis of Avian Influenza (H5N5) Viruses Isolated in the Southwestern European Part of the Russian Federation in 2020–2021. Viruses 2022, 14, 2725. https://doi.org/10.3390/v14122725.Zinyakov, N.; Andriasov, A.; Zhestkov, P.; Kozlov, A.; Nikonova, Z.; Ovchinnikova, E.; Grekhneva, A.; Shcherbakova, L.; Andreychuk, D.; Sprygin, A.; and others . Analysis of avian influenza (H5N5) viruses isolated in the South-West of the European part of the Russian Federation in 2020-2021 Viruses 2022, 14, 2725. https:// doi.org/10.3390/v14122725 .

The authors declare that there are no conflicts of interest present.