ivmМеждународный вестник ветеринарииInternational Journal of Veterinary Medicine2072-2419SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2072-2419.2025.2.215ivm-1710Research ArticleБИОХИМИЯ, МОРФОЛОГИЯ, ФИЗИОЛОГИЯBIOCHEMISTRY, ANATOMY, PHYSIOLOGYАдаптация ИФА набора Продоксин-афлатоксин В1 для определения концентрации Афлатоксина В1 в органах свинейAdaptation of the Prodoxin-aflatoxin B1 ELISA kit to determine the concentration of Aflatoxin B1 in pig organsПанковецЕ. М.PankovetsE. M.

магистр ветеринар. наук, асс. каф. анатомии животных

Master of Veterinary Sciences, Assistant of the Department of Animal Anatomy

pankovec.evgeniii@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-1255-4863ЛяхА. Л.LyakhA. L.

канд. ветеринар. наук, зав. каф. анатомии животных,

Candidate of Veterinary Sciences, Head of the Department of Animal Anatomy

УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины»БеларусьEducational Establishment "Vitebsk State Awarded the "Badge of Honor" Order Veterinary Medicine Academy"Belarus20250108202502215223Copyright © Панковец Е.М., Лях А.Л., 20252025Панковец Е.М., Лях А.Л.Pankovets E.M., Lyakh A.L.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vetjournal.spbguvm.ru/jour/article/view/1710

Микотоксины являются группой биологически активных веществ, попадание которых в организм сельскохозяйственных животных невозможно предотвратить полностью. В статье приводятся результаты экспериментальных исследований по адаптации набора ПРОДОСКРИН ИФА-Афлатоксин В1 для определения концентрации афлатоксина В1 в гомогенатах печени свиней. В процессе пробоподготовки, печень гомогенизировалась и случайным образом делилась на навески массой 5 грамм. Методика основана на постановке прямого конкурентного иммуноферментного анализа, принцип действия которого заключается в избирательном связывании специфического антигена с антителом, который под действием фермента, в составе связанного с антителами конъюгата, превращается в окрашенный продукт. Суть комплекса мероприятий по адаптации данного метода заключается в использовании методики по поиску антигенов не в заявленном в инструкции растительном сырье, а в органах свиней. В статье приводятся подробные данные по пробоподготовке органов к исследованию, расчетам дозировок афлатоксина В1, вносимых в гомогенат печени, а также описываются этапы постановки иммуноферментного анализа. Полученные в ходе эксперимента данные, по адаптации ИФА-набора для определения концентрации афлатоксина В1 не только в растительном сырье, но и в гомогенатах печени свиней, позволяют сделать ряд выводов, где прямой конкурентный ИФА может быть использован в составе комплексной диагностики микотоксикозов в условиях сельскохозяйственных предприятий как экспресс метод для качественной (афлатоксин В1 есть в органе\афлатоксина В1 в органе нет) оценки наличия афлатоксина В1 в органах свиней. Так же учитывая погрешность измерения от 0 до 28% данный метод позволяет дать полуколичественную оценку содержания афлатоксина В1 в гомогенате печени свиней. Так же мы отметили, чем ниже объем Афлатоксина В1, вносимый в гомогенат печени, тем меньше погрешность при определении данных концентраций методом прямого конкурентного ИФА.

Mycotoxins are a group of biologically active substances, the penetration of which into the organism of farm animals cannot be completely prevented. The article presents the results of experimental studies on the adaptation of the PRODOSCREEN IFAAflatoxin B1 kit for determining the concentration of aflatoxin B1 in pig liver homogenates. The material (whole liver) was collected from one animal at a slaughterhouse. During sample preparation, the liver was homogenized and randomly divided into 5- gram portions. The technique is based on the formulation of a direct competitive enzyme immunoassay, the principle of which is the selective binding of a specific antigen to an antibody, which, under the action of an enzyme, as part of an antibody-bound conjugate, turns into a colored product. The essence of the set of measures for the adaptation of this method is to use the technique for searching for antigens not in the plant materials declared in the instructions, but in the organs of pigs. The article provides detailed data on the preparation of organ samples for the study, calculations of aflatoxin B1 dosages introduced into the liver homogenate, and describes the stages of setting up an enzyme immunoassay. The data obtained during the experiment on the adaptation of the ELISA kit for determining the concentration of aflatoxin B1 not only in plant materials, but also in pig liver homogenates, allow us to draw a number of conclusions where direct competitive ELISA can be used as part of a comprehensive diagnosis of mycotoxicoses in agricultural enterprises as an express method for qualitative (aflatoxin B1 is in the organ / aflatoxin B1 is not in the organ) assessment of the presence of aflatoxin B1 in pig organs. Also, taking into account the measurement error from 0 to 28%, this method allows for a semi-quantitative assessment of the content of aflatoxin B1 in pig liver homogenate. We also noted that the lower the volume of Aflatoxin B1 introduced into the liver homogenate, the lower the error in determining these concentrations using the direct competitive ELISA method.

адаптациямикотоксиныафлатоксин В1иммуноферментный анализadaptationmycotoxinsaflatoxin B1enzyme immunoassayМатериалы подготовлены в рамках научноисследовательской работы по теме «Патоморфогенез микотоксикозной полиорганной недостаточности у свиней в онтогенезе».The materials were prepared as part of the research work on the topic “Pathomorphogenesis of mycotoxicosis multiple organ failure in pigs during ontogenesis”.ReferencesНауменко Н. В., Ботвинникова В. В., Сотникова В., Грживна Л., Белоглазова Н. В. Микотоксины и безопасность продуктов питания: явные и скрытые угрозы // Вестник ЮжноУральского государственного университета. Серия: Пищевые и биотехнологии. – 2020. № 1. – С. 105-111. Режим доступа: https://cyberleninka.ru/article/n/mikotoksiny-i-bezopasnostproduktov-pitaniya-yavnye-i-skrytyeugrozy/viewerNaumenko N.V., Botvinnikova V.V., Sotnikova V., Grzhivna L., Beloglazova N.V. Mycotoxins and food safety: obvious and hidden threats // Bulletin of the South Ural State University. Series: Food and Biotechnology. – 2020. No. 1. – P. 105-111. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/mikotoksiny -i-bezopasnost-produktov-pitaniya-yavnye-iskrytye-ugrozy/viewer (in Russ.).Солдатенко, Н. А. Роль микотоксинов в этиологии массовых заболеваний свиней / Н. А. Солдатенко, Л. Н. Фетисов, Н. В. Стрельцов, В. А. Русанов, А. В. Коваленко // Материалы Всероссийской научнопрактической конференции «Актуальные проблемы ветеринарного обеспечения Российского животноводства». – Новочеркасск. – 2010. – С. 112-118.Soldatenko N.A. The role of mycotoxins in the etiology of mass diseases of pigs / N.A. Soldatenko, L.N. Fetisov, NV Streltsov, VA Rusanov, AV Kovalenko // Materials of the All-Russian Scientific Conference «Actual problems of veterinary support of Russian livestock». – Novocherkassk. – 2010. – P. 112-118Иваницкий М. Е., Ображей А. Ф., Рухляда В. В., Котик А. Н. Патоморфологическая диагностика микотоксикозов свиней // Материалы Всероссийской научнометодической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины: Сб. науч. тр. / ОГМА. – Омск. – 2000. C. 85.Ivanitsky M.E., Obrazhey A.F., Rukhlyada V.V., Kotik A.N. Pathomorphological diagnostics of mycotoxicoses in pigs // Proceedings of the All-Russian scientific and methodological conference of pathologists of veterinary medicine: Collection of scientific papers / OSMU. – Omsk. – 2000. – P. 85. (in Russ.).Григорян А. В., Карапетян А. Ф., Дживанян К. А. Об особенностях гистоморфологии печени при поступлении с кормом микотоксинов. // Успехи медицинской микологии. – Т.12. – Национальная академия микологии. – 2014. – C. 166-168.Grigoryan A.V., Karapetyan A.F., Dzhivanyan K.A. On the features of liver histomorphology upon intake of mycotoxins with feed. // Advances in Medical Mycology. – V.12. – National Academy of Mycology, 2014. – P. 166-168. (in Russ.).Панковец, Е. М. Использование иммуноферментного анализа для определения концентрации микотоксинов в органах, тканях и биологических жидкостях (обзор) / Е. М. Панковец, А. Л. Лях // Актуальные проблемы лечения и профилактики болезней молодняка: материалы Международной научно-практической конференции (Витебск, 2-4 ноября 2020 г.) / Витебская государственная академия ветеринарной медицины, Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии. – Витебск: ВГАВМ. – 2020. – С. 104-108. Режим доступа: https://elibrary.ru/item.asp?id=44579081Pankovets, E. M. Use of enzyme-linked immunosorbent assay to determine the concentration of mycotoxins in organs, tissues and biological fluids (review) / E. M. Pankovets, A. L. Lyakh // Actual problems of treatment and prevention of diseases of young animals: materials of the International scientific and practical conference (Vitebsk, November 2-4, 2020) / Vitebsk State Academy of Veterinary Medicine, Russian Research Veterinary Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy. – Vitebsk: VGAVM, – 2020. – P. 104-108. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=44579081 (in Russ.).Сайфутдинов, А. М. Определение микотоксинов в органах и тканях животных методом хромато-масс-спектрометрии / А. М. Сайфутдинов, Д. Н. Бузюрова, И. М. Фицев // Современные проблемы экспериментальной и клинической токсикологии, фармакологии и экологии: Сборник тезисов докладов Международной научно-практической конференции, Казань, 09-10 сентября 2021 года. – Казань: Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности. – 2021. – С. 133-135. Режим доступа: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=48038786Saifutdinov, A. M. Determination of mycotoxins in animal organs and tissues by chromatography-mass spectrometry / A. M. Saifutdinov, D. N. Buzyurova, I. M. Fitsev // Modern problems of experimental and clinical toxicology, pharmacology and ecology: Collection of abstracts of reports of the International scientific and practical conference, Kazan, September 9-10, – 2021. – Kazan: Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, – 2021. – P. 133 -135. URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=48038786 (in Russ.).Чернова А.В., Петроченкова А.В. Современные методы определения контаминации молока афлатоксином М1 // Научные труды Дальрыбвтуза. – 2022. – Т. 62, № 4. – С. 25-33.Chernova A.V., Petrochenkova A.V. Modern methods for determining the contamination of milk with aflatoxin M1. Scientific Journal of the Far Eastern State Technical Fisheries University. – 2022. – Т. 62, № 4 – Р. 25-33. (in Russ.).Sun L.H., Lei M.Y., Zhang N.Y., Gao X., Li C., Krumm C.S., Qi D.S. Individual and combined cytotoxic effects of aflatoxin B1, zearalenone, deoxynivalenol and fumonisin B1 on BRL 3A rat liver cells. Toxicon, – 2015, – P. 6-12. Режим доступа: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25549941/Sun L.H., Lei M.Y., Zhang N.Y., Gao X., Li C., Krumm C.S., Qi D.S. Individual and combined cytotoxic effects of aflatoxin B1, zearalenone, deoxynivalenol and fumonisin B1 on BRL 3A rat liver cells. Toxicon, 2015, – P. 6-12 URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25549941/Вашкевич И. И., Терентьева Т. В., Корнилович Г. С., Сухенко Л. Н., Шибеко А. И., Свиридов О. В. Новый набор реагентов для иммуноферментного определения афлатоксина в1 в кормах и пищевых продуктах // Вестник национальной академии наук Беларуси. Серия: Химические науки. – 2016. – № 2. – С. 69-76. Режим Доступа: https://vestichem.belnauka.by/jour/article/view/196?locale=ru_RUVashkevich I. I., Terentyeva T. V., Kornilovich G. S., Sukhenko L. N., Shibeko A. I., Sviridov O. V. New set of reagents for enzyme-linked immunosorbent assay of aflatoxin B1 in feed and food products // Bulletin of the National Academy of Sciences of Belarus. Series: Chemical Sciences. – 2016. – № 2. – P. 69-76. URL: https://vestichem.belnauka.by/jour/article/view/196?locale=ru_RU (in Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.