ivmМеждународный вестник ветеринарииInternational Journal of Veterinary Medicine2072-2419SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2072-2419.2025.2.364ivm-1732Research ArticleХИРУРГИЯSURGERYСравнительная способность тромбоцитов, выделенных из образцов крови, стабилизированных цитратом натрия, эдта или гепарином, к агрегации в ответ на активацию некоторыми агонистамиThe comparative ability of platelets isolated from blood samples stabilized with sodium citrate, edta, or heparin to aggregate in response to activation by certain agonistshttps://orcid.org/0000-0002-4176-4053МининаА. О.MininaA. O.

канд. ветеринар. наук, доц. каф. общей, частной и оперативной хирургии 

Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor of the Department of General, Private and Operative Surgery

bluzma-nast@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4623-5388БокаревА. В.BokarevA. V.

д-р ветеринар. наук, доц. каф. общей, частной и оперативной хирургии 

Doctor of Veterinary Sciences, Associate Professor of the Department of General, Private and Operative Surgery

https://orcid.org/0000-0002-2906-4716ХолодныйР. Д.KholodnyR. D.

соиск. каф. общей, частной и оперативной хирургии 

applicant of the Department of General, Private and Operative Surgery

ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»РоссияSt. Petersburg State University of Veterinary MedicineRussian Federation20250108202502364375Copyright © Минина А.О., Бокарев А.В., Холодный Р.Д., 20252025Минина А.О., Бокарев А.В., Холодный Р.Д.Minina A.O., Bokarev A.V., Kholodny R.D.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vetjournal.spbguvm.ru/jour/article/view/1732

Исследована способность к активации тромбоцитов, выделенных из образцов крови стабилизированных цитратом натрия, ЭДТА или гепарином и находящихся в плазме, содержащей тот же антикоагулянт. Тромбоциты, находящиеся в плазме, индуцировали к активации in vitro путем добавления таких агонистов как адреналин, тромбин или тромбин+тромбоксан-А2. В качестве маркера активации использовали способность тромбоцитов образовывать агрегаты, которые визуализировали микроскопически в фазовом контрасте. Исследования показали, что тромбоциты выделенные из образцов крови стабилизированных любым из выше указанных антикоагулянтов не агрегировали в ответ на добавление адреналина. Тромбоциты, выделенные из крови, стабилизированной цитратом натрия и ЭДТА, сохраняли способность к агрегации после рекальцификации плазмы, но не агрегировали в ответ на добавление тромбина. Но тромбоциты, выделенные из крови, стабилизированной цитратом натрия, в отличии от тромбоцитов, выделенных из крови, стабилизированной ЭДТА агрегировали в ответ на добавление тромбина вместе с тромбоксаном-А2. Тромбоциты, выделенные из крови стабилизированной гепарином умеренно агрегировали на активацию тромбином и очень сильно на активацию тромбин + тромбоксан-А2. Результаты исследования, полученные в модели in vitro, свидетельствуют о том, что тромбоциты, выделенные из образцов крови стабилизированных цитратом натрия или ЭДТА, после их введения в ткани пациента в составе плазмы содержащей тот же антикоагулянт, смогут активироваться и реализовать свой регенеративный потенциал только при условии быстрой рекальцификации. А тромбоциты, полученные в форме плазмы, обогащенной тромбоцитами из образцов крови стабилизированных гепарином, смогут активироваться и реализовать свой регенеративный потенциал только в том случае, если введенный антикоагулянт не будет препятствовать процессам плазменного и тромбоцитарного гемостаза в месте введения и, соответственно синтезу тромбина и тромбоксана-А2.

The ability to activate platelets isolated from blood samples stabilized with sodium citrate, EDTA or heparin and located in plasma containing the same anticoagulant was studied. Platelets found in plasma were induced to activate in vitro by adding agents such as epinephrine, thrombin, or thrombin+thromboxane-A2. The ability of platelets to form aggregates, which were microscopically visualized in phase contrast, was used as an activation marker. The studies showed that platelets isolated from blood samples stabilized with any of the abovementioned anticoagulants did not aggregate in response to the addition of adrenaline. Platelets isolated from blood stabilized with sodium citrate and EDTA retained the ability to aggregate after plasma recalcification, but did not aggregate in response to the addition of thrombin. However, platelets isolated from sodium citrate-stabilized blood, unlike platelets isolated from EDTA-stabilized blood, aggregated in response to the addition of thrombin along with thromboxane-A2. Platelets isolated from heparin-stabilized blood were moderately aggregated for thrombin activation and very strongly for thrombin + thromboxane-A2 activation. The results of the study obtained in an in vitro model indicate that platelets isolated from blood samples stabilized with sodium citrate or EDTA, after their introduction into the patient's tissues as part of plasma containing the same anticoagulant, will be able to activate and realize their regenerative potential only under the condition of rapid recalcification. And platelets obtained in the form of plasma enriched with platelets from heparinstabilized blood samples will be able to activate and realize their regenerative potential only if the injected anticoagulant does not interfere with the processes of plasma and platelet hemostasis at the injection site and, accordingly, the synthesis of thrombin and thromboxane-A2.

тромбоцитыантикоагулянтытромбоцитарная плазмаактивацияагрегациярегенеративная терапиятромбинтромбоксан-А2plateletsanticoagulantsplatelet plasmaactivationaggregationregenerative therapythrombinthromboxane-A2ReferencesLei, H. The effect of anticoagulants on the quality and biological efficacy of plateletrich plasma / Lei H., Gui L., Xiao R. // Clinical Biochemistry. – 2009. - № 42. – р. 1452– 1460.Lei, H. The effect of anticoagulants on the quality and biological efficiency of plateletrich plasma / Lei H., Gui L., Xiao R. // Clinical Biochemistry. – 2009. - No. 42. – p. 1452 –1460.Sharda, A. The life cycle of platelet granules / A. Sharda, R. Flaumenhaft // F1000Res. – 2018. – V. 28. - № 7. – P. 236.Sharda, A. The life cycle of platelet granules / A. Sharda, R. Flaumen-haft // F1000Res. – 2018. – V. 28. - No. 7. – P. 236.Основы клинической ветеринарной гематологии: учебное пособие для вузов / С. П. Ковалев, А. В. Туварджиев, В. А. Коноплев, Р. М. Васильев. - 2-е изд., стер. - Санкт-Петербург: Лань, 2023. - 120 с. - ISBN 978-5-507-47198-0Fundamentals of Clinical Veterinary Hematology: a textbook for universities / S. P. Kovalev, A. V. Tuvardzhiev, V. A. Konoplev, R. M. Vasiliev. - 2nd ed., reprinted. - Saint Petersburg: Lan, 2023. - 120 p. - ISBN 978-5-507-47198-0Активаторы, рецепторы и пути внутриклеточной сигнализации в тромбоцитах крови / В.И. Шатурный, С.С. Шахиджанов, А.Н. Свешникова, М.А. Пантелеев // Биомедицинская химия. – 2014. – Т. 60, № 2. – С. 182-200.Activators, receptors and intracellular signaling pathways in blood platelets / V.I. Shaturny, S.S. Shakhidzhanov, A.N. Sveshnikova, M.A. Panteleev // Biomedical chemistry. - 2014. - Vol. 60, No. 2. - P. 182-200.Рагимов, Г.А. Неактивированная тромбоцитарно- лейкоцитарная аутоплазма в лечении нерубцовых алопеций / Рагимов Г.А., Олисова О.Ю., Егорова К.Г. // Российский журнал кожных и венерических болезней. – 2016. - № 9(6). – с. 369-377.Ragimov, G.A. Non-activated plateletleukocyte autoplasma in the treatment of non -scarring alopecia / Ragimov G.A., Olisova O.Yu., Egorova K.G. // Russian Journal of Skin and Venereal Diseases. - 2016. - No. 9 (6). - p. 369-377.Evaluation of subcutaneous infiltration of autologous platelet-rich plasma on skinwound healing in dogs / Farghali H., Kader N., Khattab M., [e.t.c.] // Bioscience Reports. – 2017. - № 37. – р. 1 – 13.Evaluation of subcutaneous infiltration of autologous platelet-rich plasma on skinwound healing in dogs / Farghali H., Kader N., Khattab M., [e.t.c.] // Bioscience Reports. – 2017. - No. 37. – r. 1 – 13.Evaluation of Three Methods of PlateletRich Plasma for Treatment of Equine Distal Limb Skin Wounds / Pereira R., Côrte F., Brass K., [e.t.c.] // Journal of Equine Veterinary Science. – 2019. - № 72. – р.1-7.Evaluation of Three Methods of PlateletRich Plasma for Treatment of Equine Distal Limb Skin Wounds / Pereira R., Côrte F., Brass K., [e.t.c.] // Journal of Equine Veterinary Science. – 2019. - No. 72. – pp. 1-7.Subconjunctival application of plasma platelet concentrates in the treatment of ocular burns: Preliminary results / Marquez-DeAracena R., Montero-De-Espinosa I., Munoz M., Pereira G. // Archivos de la Sociedad Española de Oftalmología. – 2007. – V. 82. - № 8. – р. 475-481.Subconjunctival application of plasma platelet concentrate in the treatment of ocular burns: Preliminary results / Marquez-DeAracena R., Montero-De-Espinosa I., Munoz M., Pereira G. // Archivos de la Sociedad Española de Of-talmología. – 2007. – V. 82. - No. 8. – p. 475-481.Monteiro, S. Effects of platelet-rich plasma on the repair of wounds on the distal aspect of the forelimb in horses / Monteiro S., Lepage O., Theoret C. // American Journal of Veterinary Research. – 2009. - № 70 (2). – р. 277-82.Monteiro, S. Effects of platelet-rich plasma on the repair of wounds on the distal aspect of the forelimb in horses / Monteiro S., Lepage O., Theoret C. // American Journal of Veterinary Research. – 2009. - No. 70 (2). – r. 277-82.Комаровский, В. А. Система "Плазмолифтинг" в комплексном лечении травм сухожильно-связочного аппарата у лошадей / Комаровский В. А., Кранина В. А. // Аграрное образование и наука для агропромышленного комплекса: материалы республиканской научно-практической конференции. Белорусская агропромышленная неделя БЕЛАГРО2024, Индустриальный парк "Великий камень", 5 июня 2024 г. / Белорусская государственная сельскохозяйственная академия [и др.]. - Горки: БГСХА, 2024. - С. 117-120.Komarovsky, V. A. The "Plasmolifting" system in the complex treatment of tendonligament apparatus injuries in horses / Komarovsky V. A., Kranina V. A. // Agrarian education and science for the agro-industrial complex: materials of the republican scientific and practical conference. Belarusian agro-industrial week BELAGRO-2024, Industrial Park "Great Stone", June 5, 2024 / Belarusian State Agricultural Academy [and others]. - Gorki: BGSHA, 2024. - P. 117- 120.Фефелов, А.А. Оценка эффективность плазмолифтинга в модели экспериментального пародонтита / Фефелов А.А., Цыбиков Н.Н., Фефелова Е.В. // Актуальные проблемы патофизиологии. Сборник научных статей Международной научно-практической конференции. Под общей редакцией Н.В. Ларёвой. Чита, 2022. - С. 152-157.Fefilov, A. A. Evaluation of the effectiveness of plasmolifting in the model of experimental periodontitis / Fefilov A. A., Tsybikov N. N., Fefelova E. V. // Actual problems of pathophysiology. Collection of scientific articles of the International Scientific and Practical Conference. General editor N.V. Lareva. Chita, 2022. - P. 152-157.Эффективность применения лизата богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) у пациентов с эрозией роговицы или посттравматическим рубцеванием тканей век / Боровкова Н.В., Филатова И.А., Ченцова Е.В., и др. // Российский офтальмологический журнал. – 2020. № 13(3). – с. 8-14.Efficiency of using platelet-rich plasma (PRP) lysate in patients with corneal erosion or post-traumatic scarring of eyelid tissues / Borovkova N.V., Filatova I.A., Chentsova E.V., et al. // Russian Ophthalmological Journal. - 2020. No. 13 (3). - P. 8-14.Обогащенные тромбоцитарной плазмой альгинатные скаффолды и гипокcически активированные фибробласты в терапии хронических раневых дефектов кожи / Е.В. Соловьева, О.И. Кляйн, К.А. Дариенко и др. // Вестник Военного инновационного технополиса «ЭРА». - 2023. - T. 4. - № 2. – С. 136-145.Platelet-rich plasma alginate scaffolds and hypoxic activated fibroblasts in the therapy of chronic wound skin defects / E.V. Solovieva, O.I. Klein, K.A. Darienko et al. // Bulletin of the Military Innovation Technopolis "ERA". - 2023. - Vol. 4. - No. 2. – Pp. 136-145.Возможности богатой тромбоцитами плазмы в лечении дефектов роговицы (экспериментальное исследование) / Е.В. Федосеева, Е.В. Ченцова, Н.В. Боровкова и др. // Точка зрения. Восток - Запад. - 2019. - № 1. - С. 51-53.Possibilities of platelet-rich plasma in the treatment of corneal defects (experimental study) / E.V. Fedoseeva, E.V. Chentsova, N.V. Borovkova et al. // Point of view. East - West. - 2019. - No. 1. - Pp. 51-53.Оптимизация способа получения богатой тромбоцитами плазмы для использования в клинической практике / К.И. Бурыкин, Н.В. Боровкова, М.С. Макаров и др. // Неотложная медицинская помощь. Журнал им. Н.В. Склифосовского. - 2023. - Т. 12. - № 2. - С. 268-273.Optimization of the method for obtaining platelet-rich plasma for use in clinical practice / K.I. Burykin, N.V. Borovkova, M.S. Makarov et al. // Emergency medical care. Journal named after N.V. Sklifosovsky. - 2023. - V. 12. - No. 2. - P. 268-273.Крячко, О.В. Патологическая физиология животных. Краткий курс лекций по типовым патологическим процессам: учебное пособие / О. В. Крячко, Л. А. Лукоянова; МСХ РФ, СПбГУВМ. - Санкт -Петербург: Изд-во СПбГУВМ, 2024. - 98 с.Kryachko, O. V. Pathological physiology of animals. A short course of lectures on typical pathological processes: a tutorial / O. V. Kryachko, L. A. Lukoyanova; Ministry of Agriculture of the Russian Federation, St. Petersburg State University of Medicine. - St. Petersburg: Publishing house of St. Petersburg State University of Medicine, 2024. – 98 p.Дефицит магния и гиперкоагуляционные состояния: метрический анализ данных выборки пациентов 18–50 лет лечебно-профилактических учреждений России / О.А. Громова, И.Ю. Торшин, Ж.Д. Кобалава и др. // Кардиология. – 2018. – Т. 58. - № 4. – С. 20 – 32.Magnesium deficiency and hypercoagulable states: metric analysis of data from a sample of patients aged 18–50 years in medical and preventive institutions of Russia / O. A. Gromova, I. Yu. Torshin, Zh. D. Kobalava et al. // Cardiology. – 2018. – T. 58. – No. 4. – P. 20 – 32.Shechter, M. The role of magnesium as antithrombotic therapy / M. Shechter // Wiener Medizinische Wochenschrift. – 2000. – V. 150. - № 15-16. – P. 343-347.Shechter, M. The role of magnesium as antithrombotic therapy / M. Shechter // Wiener Medizinische Wochenschrift. – 2000. – V. 150. - No. 15-16. – P. 343-347.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.