ivmМеждународный вестник ветеринарииInternational Journal of Veterinary Medicine2072-2419SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2072-2419.2026.1.455ivm-2036Research ArticleХИРУРГИЯSURGERYВлияние секретома мезенхимальных стволовых клеток лошади на агрегацию тромбоцитов in vitroEffect of the secretome of horse mesenchymal stem cells on platelet aggregation in vitrohttps://orcid.org/0000-0001-9035-0036НечаевА. Ю.NechaevA. Y.

д-р ветеринар. наук, проф., зав. каф.общей, частной и оперативной хирургии, интерн

Doctor of Veterinary Sciences, Professor, Head of the Department of General, Private and Operative Surgery

https://orcid.org/0000-0002-4623-5388БокаревА. В.BokarevA. V.

д-р ветеринар. наук, доц. каф. общей, частной и оперативной хирургии

Doctor of Veterinary Sciences, Associate Professor, Associate Professor of the Department of General,  Private and Operative Surgery 

https://orcid.org/0000-0002-4176-4053МининаА. О.MininaA. O.

канд. ветеринар. наук, доц., доц. кафедры общей, частной и оперативной хирургии 

PhD, Associate Professor, Associate Professor of the Department of General, Private and Operative Surgery

bluzma-nast@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1413-4486СорокаВ. А.SorokaV. A.

канд. ветеринар. наук, асс. каф. общей, частной и оперативной хирургии

PhD, Assistant Professor at the Department of General, Private and Operative Surgery of the Department of General, Private and Operative Surgery

https://orcid.org/0000-0002-0528-671XАлиС. Г.AliS. G.

канд. биол. наук, начальник НПЛ клеточных технологий

PhD, Head of NPL of Cellular Technologies 

ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»; ФГБОУ ВО «Донской государственный технический университет»РоссияSt. Petersburg State University of Veterinary Medicine; Don State Technical UniversityRussian FederationФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины»РоссияSt. Petersburg State University of Veterinary MedicineRussian FederationООО «Стэм реновацио»РоссияStem Renovation LLCRussian Federation20263004202601455460Copyright © Нечаев А.Ю., Бокарев А.В., Минина А.О., Сорока В.А., Али С.Г., 20262026Нечаев А.Ю., Бокарев А.В., Минина А.О., Сорока В.А., Али С.Г.Nechaev A.Y., Bokarev A.V., Minina A.O., Soroka V.A., Ali S.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vetjournal.spbguvm.ru/jour/article/view/2036

Исследовали влияние секретома МСК лошади на способность к индукции тромбообразования in vitro путем визуального оценки агрегации тромбоцитов под действием данного препарата на предметном стекле по методу А. С. Шитиковой, наблюдая процесс под фазовым контрастом. Определение влияния секретома на тромбообразование in vitro проводили на тромбоцитарной плазме, выделенной из крови лошадей с антикоагулянтом - цитратом натрия. В пробирки с тромбоцитарной плазмой вносили физиологический раствор (контроль 1), 10,0% раствора хлорида кальция (контроль 2), секретом в пропорции 10 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома (опыт 1), секретом в пропорции 20 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома (опыт 2), секретом в пропорции 20 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома и 10,0% раствора хлорида кальция (опыт 3). После добавления контрольных и опытных препаратов к образцам тромбоцитарной плазмы, 10,0 мкл смеси микроскопировали при увеличении Х400 используя фазовый контраст. В результате наших исследований были получены данные, указывающие на то, что у секретома МСК лошади отсутствует способность индуцировать агрегацию тромбоцитов. Плазма, обогащенная тромбоцитами, полученная от лошадей (n=10) с цитратом натрия не проявляла признаков агрегации, в отличие от плазмы, обогащенной тромбоцитами с цитратом натрия, активированная хлористым кальцием. При добавлении секретома в концентрациях 10 к 1 (10 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома) и 20 к 1 (20 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома) агрегация тромбоцитов также не наблюдалась. В то же время, при внесении хлористого кальция в образец плазмы, обогащенной тромбоцитами с добавлением секретома, агрегация тромбоцитов была в пределах нормы.

The effect of the equine MSCs secretome on the ability to induce thrombosis in vitro was studied by visually assessing platelet aggregation under the action of this drug on a slide using the A. S. Shitikova method, observing the process under phase contrast. The effect of secretome on thrombosis in vitro was determined on platelet plasma isolated from horse blood with the anticoagulant sodium citrate. Saline solution (control 1), 10.0% calcium chloride solution (control 2), a secret in the proportion of 10 parts of the volume of plasma enriched with platelets to 1 part of the secretome (experiment 1), a secret in the proportion of 20 parts of the volume of plasma enriched with platelets to 1 part of the secretome (experiment 2) were added to tubes with platelet plasma, a secret in the proportion of 20 parts of the volume of plasma enriched with platelets to 1 part of the secretome and 10.0% calcium chloride solution (experiment 3). After adding control and experimental preparations to platelet plasma samples, 10.0 µl of the mixture was microscoped at X400 magnification using phase contrast. As a result of our research, data were obtained indicating that the secretome of horse MSCs lacks the ability to induce platelet aggregation. Platelet-rich plasma obtained from horses (n=10) with sodium citrate showed no signs of aggregation, unlike platelet-rich plasma with sodium citrate activated with calcium chloride. When secretome was added at concentrations of 10 to 1 (10 parts of platelet-rich plasma volume to 1 part of secretome) and 20 to 1 (20 parts of platelet-rich plasma volume to 1 part of secretome), platelet aggregation was also not observed. At the same time, when calcium chloride was added to a platelet-enriched plasma sample with the addition of secretome, platelet aggregation was within the normal range.

тромбоцитысекретомтромбообразованиеагрегациисосудисто-тромбоцитарный гемостазplateletssecretionsthrombosisaggregationsvascular-platelet hemostasisМатериалы подготовлены в рамках Российского научного фонда 2025 года «Использование продуктов секреции мезенхимальных стволовых клеток для стимуляции физиологической и репаративной регенерации кардиореспираторной системы у лошадей» (соглашение №25-16-00265 от 29.05.2025).The materials were prepared within the framework of the Russian Science Foundation 2025 "The use of mesenchymal stem cell secretion products to stimulate the physiological and reparative regeneration of the cardiorespiratory system in horses" (Agreement No. 25-16-00265 dated 05/29/2025).ReferencesNovel potency assay for MSC secretomebased treatment of idiopathic male infertility employed Leydig cells and revealed vascular endothelial growth factor as a promising potency marker / A. Monakova, G. Sagaradze, N. Basalova, et al. // Int J Mol Sci. – 2022. – V. 23. - № 16. – Р. 9414.A new efficacy analysis for the treatment of idiopathic male infertility based on MSC secretome using Leydig cells and identifying vascular endothelial growth factor as a promising efficacy marker / A. Monakova, G. Sagaradze, N. Basalova et al. // Int J Mol Sci. - 2022. – Vol. 23. – No. 16. – R. 9414.Изучение безопасности оригинального препарата на основе секретома мезенхимных стромальных клеток при локальном введении в яички и при внутримышечном введении крысам / А.О. Монакова, Г.Д. Сагарадзе, В.Ю. Балабаньян и др. // Безопасность и риск фармакотерапии. - 2024. - №1. - С.99-116.Study of the safety of an original drug based on the secretome of mesenchymal stromal cells when injected locally into the testicles and intramuscularly into rats / A.O. Monakova, G.D. Sagaradze, V.Y. Balabanyan et al. // Safety and risk of pharmacotherapy. - 2024. - No. 1. - pp.99-116.Characterization of secretomes provides evidence for adipose-derived mesenchymal stromal cells subtypes / N. Kalinina, D. Kharlampieva, M. Loguinova, et al. // Stem Cell Res Ther. – 2015. - № 6. – Р. 221.Characteristics of secretomes make it possible to identify subtypes of mesenchymal stromal cells of fatty origin / N. Kalinina, D. Kharlampieva, M. Loginova et al. // Stem cell research. - 2015. – No. 6. - p. 221.Савченкова, И.П. Внеклеточные везикулы, в том числе экзосомы, из мезенхимных стволовых/стромальных клеток животных / И.П. Савченкова, Г.А. Надточей // Сельхозбиология. - 2023. - №6. – С. 1112-1121.Savchenkova, I.P. Extracellular vesicles, including exosomes, from mesenchymal stem/stromal cells of animals / I.P. Savchenkova, G.A. Nadtochey // Agricultural biology. 2023. No. 6. pp. 1112-1121.Расширенные исследования безопасности биологического лекарственного препарата на основе секретома мезенхимных стромальных клеток человека: иммунотоксичные и онкогенные свойства / А. О. Монакова, В. Ю. Балабаньян, В. А. Вавилова и др. // Лабораторные животные для научных исследований. - 2025.- №3. - С. 56-65.Extended safety studies of a biological medicinal product based on the secretome of human mesenchymal stromal cells: immunotoxic and oncogenic properties / A. O. Monakova, V. Y. Balabanyan, V. A. Vavilova et al. // Laboratory animals for scientific research. - 2025.- No. 3. - pp. 56-65.Влияние кондиционированной среды мезенхимальных стромальных клеток барана на качественные показатели сперматозоидов/ Е. А. Корочкина, А. В. Трифонова, А. Ю. Нечаев, В.С. Пушкина, Д.Е. Главацкая // Международный вестник ветеринарии. – 2024. – № 2. – С. 276-284.Influence of the conditioned medium of sheep mesenchymal stromal cells on the quality indicators of spermatozoa/ E. A. Korochkina, A. V. Trifonova, A. Yu. Nechaev, V. S. Pushkina, D. E. Glavatskaya // International Bulletin of Veterinary Medicine. 2024. No. 2. pp. 276-284.Teixeira, F.G. Mesenchymal stem cells secretome: current trends and future challenges / F.G. Teixeira, A.J. Salgado // Neural Regen Res. – 2020. – V. 15. - № 1. – P. 75.Teixeira, F.G. The secret of mesenchymal stem cells: current trends and challenges of the future / F.G. Teixeira, A.H. Salgado // Neural regeneration. – 2020. – Vol. 15. - No. 1. – P. 75.Куралесова, А.И. Экзосомы, продуцируемые мезенхимальными стромальными клетками, для терапии острого респираторного дистресс-синдрома: обзор доклинических и клинических исследований / А.И. Куралесова, А.Г. Грошева, Е.Н. Генкина, и др. // БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. - 2025. - №3. – С. 343-356.Kuralesova, A.I. Exosomes produced by mesenchymal stromal cells for the treatment of acute respiratory distress syndrome: a review of preclinical and clinical studies / A.I. Kuralesova, A.G. Grosheva, E.N. Genkina, et al. // Biologics. Prevention, diagnosis, and treatment. - 2025. - No. 3. – pp. 343-356.Mesenchymal stromal cell-derived secretome-based therapy for neurodegenerative diseases: overview of clinical trials / M. Ghasemi, E. Roshandel, M. Mohammadian et al. // Stem Cell Res Ther. - 2023. - V. 14. - №.1. - P.122.Mesenchymal therapy of neurodegenerative diseases based on a secretome obtained from stromal cells: a review of clinical trials / M. Ghasemi, E. Roshandel, M. Mohammadian et al. // Stem cell research. - 2023. - Vol. 14. - No. 1. - p. 122.Viktorova, E.V. Мultipotent mesenchymal stem cells in clinical veterinary practice / E.V. Viktorova, I.P. Savchenkova // IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. – 2020. – V. 548. – Р. 072072.Viktorova, E.V. Multipotent mesenchymal stem cells in clinical veterinary practice / E.V. Viktorova, I.P. Savchenkova // IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. – 2020. – V. 548. – R. 072072.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.