ivmМеждународный вестник ветеринарииInternational Journal of Veterinary Medicine2072-2419SpbGUVM Publishing House10.52419/issn2072-2419.2022.2.16ivm-861Research ArticleИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИINFECTIOUS DISEASESПрименение конъюгата на основе коллоидного золота для экспресс-диагностики бешенства в дот-иммуноанализеApplication of conjugate based on colloidal gold for express diagnostics of rabies in dot immunoanalysishttps://orcid.org/0000-0002-1732-6977АхмадеевР. М.AkhmadeevR. M.

 ведущий научный сотрудник 

 Казань 

 leading researcher, Candidate in Veterinary sciences 

 Kazan 

https://orcid.org/0000-0003-2650-6459ГалееваА. Г.GaleevaA. G.

 старший научный сотрудник 

 Казань 

 senior researcher, Candidate in Veterinary sciences 

 Kazan 

АрслановаА. Ф.ArslanovaA. F.

 старший научный сотрудник 

 Казань 

 Candidate in Veterinary sciences 

 Kazan 

https://orcid.org/0000-0001-8786-1310ЕфимоваМ. А.EfimovaM. A.

 ведущий научный сотрудник 

 Казань 

 Doctor in Biological sciences 

 Kazan 

НасыровШ. М.NasyrovSh. M.

 ведущий научный сотрудник 

 Казань 

 Candidate in Veterinary sciences 

 Kazan 

КашеваровГ. С.KashevarovG. S.

 старший научный сотрудник 

 Казань 

 Candidate in Biological sciences 

 Kazan 

ЯруллинА. И.YarullinA. I.

 старший научный сотрудник 

 Казань 

 Candidate in Biological sciences 

Kazan

https://orcid.org/0000-0002-2367-672XСальниковВ. В.SalnikovV. V.

 заведующий лабораторией

 Казань 

 Doctor in Biological sciences 

 Kazan 

ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»)РоссияFederal Center for Toxicological, Radiation and Biological SafetyRussian FederationФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»); ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана»РоссияFederal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety; Kazan State Academy of Veterinary Medicine anmed after N. E. BaumanRussian FederationКазанский институт биохимии и биофизики (КИББ) ФИЦ КазНЦ РАНРоссияFederal Research Center «Kazan Scientific Center of Russian Academy of Sciences»Russian Federation202221072022021621Copyright © Ахмадеев Р.М., Галеева А.Г., Арсланова А.Ф., Ефимова М.А., Насыров Ш.М., Кашеваров Г.С., Яруллин А.И., Сальников В.В., 20222022Ахмадеев Р.М., Галеева А.Г., Арсланова А.Ф., Ефимова М.А., Насыров Ш.М., Кашеваров Г.С., Яруллин А.И., Сальников В.В.Akhmadeev R.M., Galeeva A.G., Arslanova A.F., Efimova M.A., Nasyrov S.M., Kashevarov G.S., Yarullin A.I., Salnikov V.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vetjournal.spbguvm.ru/jour/article/view/861

Целью исследований явилась разработка прямого дот-иммуноанализа на нитроцеллюлозной мембране (НЦМ) с использованием конъюгата на основе коллоидного золота для качественного определения наличия антигена вируса бешенства в патологическом материале. В качестве исследуемых образцов использовали пробы головного мозга (ГМ) разных видов животных, явившиеся положительными при первичном исследовании методами флуоресцирующих антител: лисиц и мышей. РИФ и непрямой «сэндвич»-ИФА (иммуноферментный анализ) проводили с использованием диагностических наборов изготовленных в ФГБНУ «ФЦТРБВНИВИ». В материалах представлены результаты первичных лабораторных испытаний тест-системы для индикации рабического антигена на основе прямого дот-иммуноанализа (ДИА) 81 образца патологического материала, головного мозга разных видов животных. Показано, что ДИА обладает 100% специфичностью, а его оптические сигналы коррелируют с результатами непрямого ИФА. Предложенный метод ДИА, помимо самостоятельного применения, может также послужить базисом для конструирования тест-систем на основе иммунохимического анализа (ИХА).

The aim of the research was to develop a direct dot-immunoassay on a nitrocellulose membrane (NCM) using a conjugate based on colloidal gold for the qualitative determination of the presence of rabies virus antigen in pathological material. As the test samples, we used brain samples of various animal species, which were positive during the initial study by methods of fluorescent antibodies: foxes and mice. IFA and indirect ELISA carried out using diagnostic kits manufactured at the Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety. The materials present the results of primary laboratory tests of the test system for the indication of rabies antigen based on direct dotimmunoassay (DIA) 81 samples of pathological material, the brain of various animal species. It was shown that DIA has 100% specificity, and its optical signals correlate with the results of indirect ELISA. The proposed DIA method, in addition to independent application, can also serve as a basis for the design of test systems based on immunochemical analysis.

бешенстводот-иммуноанализиммуноферментный анализколлоидное золотоrabiesdot immunoassayELISAcolloidal goldReferencesАхмадеев, Р. М. Получение антигена вируса бешенства методом трёхфазной экстракции / Р.М. Ахмадеев, А.Г. Мухамеджанова, Н.Р. Мифтахов и др. // Ветеринарный врач. – 2020. – № 5. – С. 26-33. https://doi.org/10.33632/1998-698X.2020-5-26-33Ахмадеев, Р. М. Получение антигена вируса бешенства методом трёхфазной экстракции / Р.М. Ахмадеев, А.Г. Мухамеджанова, Н.Р. Мифтахов и др. // Ветеринарный врач. – 2020. – № 5. – С. 26-33. https://doi.org/10.33632/1998-698X.2020-5-26-33Ахмадеев, Р. М. Применение дотиммуноанализа для индикации рабического антигена в патологическом материале / Р. М. Ахмадеев, А. Ф. Арсланова, Н. Р. Мифтахов, Ш. М. Насыров, М. А. Ефимова, И. И. Самерханов // Ветеринарная патология. – 2021. – № 2. – С. 21-27.Ахмадеев, Р. М. Применение дотиммуноанализа для индикации рабического антигена в патологическом материале / Р. М. Ахмадеев, А. Ф. Арсланова, Н. Р. Мифтахов, Ш. М. Насыров, М. А. Ефимова, И. И. Самерханов // Ветеринарная патология. – 2021. – № 2. – С. 21-27.Богатырёв, В. А. Методы синтеза наночастиц с плазмонным резонансом / В. А. Богатырёв, Л. А. Дыкман, Н. Г. Хлебцов // Учебное пособие. – СГУ им. Н. Г. Чернышевского. – 2009. – 35 с.Богатырёв, В. А. Методы синтеза наночастиц с плазмонным резонансом / В. А. Богатырёв, Л. А. Дыкман, Н. Г. Хлебцов // Учебное пособие. – СГУ им. Н. Г. Чернышевского. – 2009. – 35 с.Ефимова, М.А. Оценка пригодности выделенных антирабических иммуноглобулинов для методов лабораторной диагностики: ИФА и МФА / М. А. Ефимова, А. Г. Мухамеджанова, А. Н. Чернов и др. // Ветеринарный врач. – 2018. – № 4. – С. 3-7.Ефимова, М.А. Оценка пригодности выделенных антирабических иммуноглобулинов для методов лабораторной диагностики: ИФА и МФА / М. А. Ефимова, А. Г. Мухамеджанова, А. Н. Чернов и др. // Ветеринарный врач. – 2018. – № 4. – С. 3-7.Загоскина, Т. Ю. Дот-иммуноанализ с использованием антител, меченных наночастицами коллоидного золота, для детекции ботулинического токсина в клиническом материале и пищевых продуктах / Т. Ю. Загоскина, Е. Л. Чапоргина, Е. Ю. Марков и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. – 2017. – № 4. – С. 31-35.Загоскина, Т. Ю. Дот-иммуноанализ с использованием антител, меченных наночастицами коллоидного золота, для детекции ботулинического токсина в клиническом материале и пищевых продуктах / Т. Ю. Загоскина, Е. Л. Чапоргина, Е. Ю. Марков и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. – 2017. – № 4. – С. 31-35.Недосеков, В. В. Сравнительная оценка методов лабораторной диагностики бешенства / В. В. Недосеков // Ветеринарная патология. – 2002. – № 1. – С. 41-47.Недосеков, В. В. Сравнительная оценка методов лабораторной диагностики бешенства / В. В. Недосеков // Ветеринарная патология. – 2002. – № 1. – С. 41-47.Шарапова, Н. А. Выделение гликопротеида из фиксированного штамма вируса бешенства «Москва 2532» и конструирование на его основе диагностикума для дот-иммуноанализа / Н. А. Шарапова, М. Н. Киреев, Е. Г. Абрамова и др. // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. – 2012. – № 5 (87), 1. – С. 347-350.Шарапова, Н. А. Выделение гликопротеида из фиксированного штамма вируса бешенства «Москва 2532» и конструирование на его основе диагностикума для дот-иммуноанализа / Н. А. Шарапова, М. Н. Киреев, Е. Г. Абрамова и др. // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. – 2012. – № 5 (87), 1. – С. 347-350.Léchenne, M. Validation of a Rapid Rabies Diagnostic Tool for Field Surveillance in Developing Countries / M. Léchenne, K. Naïssengar, A. Lepelletier, I. O. Alfaroukh, H. Bourhy // PLoS Negl Trop Dis. – 2016. – 10(10):e0005010. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005010.Léchenne, M. Validation of a Rapid Rabies Diagnostic Tool for Field Surveillance in Developing Countries / M. Léchenne, K. Naïssengar, A. Lepelletier, I. O. Alfaroukh, H. Bourhy // PLoS Negl Trop Dis. – 2016. – 10(10):e0005010. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005010.Mahadevan, A. Perspectives in Diagnosis and Treatment of Rabies Viral Encephalitis / A. Mahadevan, M. S. Suja, R. S. Mani, S. K. Shankar // Insights from Pathogenesis. Neurotherapeutics. – 2016. – 13(3). – P. 477-92. https://doi.org/10.1007/s13311-016-0452-4.Mahadevan, A. Perspectives in Diagnosis and Treatment of Rabies Viral Encephalitis / A. Mahadevan, M. S. Suja, R. S. Mani, S. K. Shankar // Insights from Pathogenesis. Neurotherapeutics. – 2016. – 13(3). – P. 477-92. https://doi.org/10.1007/s13311-016-0452-4.Nadyrova, A. I. Obtaining rabies virus purified antigen / A. I. Nadyrova, M. A. Efimova, A. G. Mukhamedzhanova et al. // Asian Journal of Pharmaceutics. – 2018. – № 12 (4). – P. 1299-1303.Nadyrova, A. I. Obtaining rabies virus purified antigen / A. I. Nadyrova, M. A. Efimova, A. G. Mukhamedzhanova et al. // Asian Journal of Pharmaceutics. – 2018. – № 12 (4). – P. 1299-1303.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.