Исследование эффекта эстральной сыворотки коров при добавлении в среду для дозревания ооцит-кумулюсных комплексов IN VITRO

Получение эмбрионов сельскохозяйственных животных in vitro – это один из методов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), который может применяться как прижизненно, так и постмортально. Цель и задачи: провести исследование эффекта эстральной сыворотки крупного рогатого скота на мейотическое созревание ооцита крупного рогатого скота (КРС) и ранний эмбриогенез до развития бластоцист, при добавлении в среду для дозревания ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК). Было проведено слепое рандомизированное контролируемое исследование по влиянию эстральной сыворотки крупного рогатого скота на развитие бластоцист при добавлении в среду для дозревания ОКК. Эстральную сыворотку получали из крови клинически здоровых коров с ярко выраженными признаками стадии возбуждения полового цикла. Исследование проводились в условиях промышленного животноводства при реализации коммерческого проекта в Вологодской и Рязанской областях. Материалом для исследования являлись ооцит-кумулюсные комплексы, полученные методом прижизненной аспирации от 89 коров голштинской породы с молочной продуктивностью более 10 тыс. кг. за лактацию. Ооцит - кумулюсные комплексы были разделены на 2 группы: 1 группа (контроль) – дозревание ооцитов проводилось в коммерческой среде IVM (производство Китай) без добавления эстральной сыворотки, 2 группа (опыт) – дозревание ооцитов проводилось в коммерческой IVM среде с добавлением эстральной сыворотки в концентрации от 5 до 15%. Содержащиеся в эстральной сыворотке гормоны, ростовые факторы и биологически активные вещества не оказывают эффекта на достижение ОКК стадии метафазы II мейоза, а также на этапе дроблений, более того, прослеживается негативный эффект на этих стадиях развития. Однако содержащиеся в эстральной сыворотке вещества способны аккумулироваться в ОКК на стадии дозревания до метафазы II мейоза, при этом усиливая потенциал ооцитов к эмбриональному развитию и в дальнейшем положительно влиять на достижение ими стадии бластоцисты. Разница в образовании бластоцист от дробящихся эмбрионов достигает более 25%, а разница в образовании бластоцист от жизнеспособных ОКК, дозреваемых в средах без добавления сыворотки и модифицированных эстральной сывороткой составляет 37,5% в пользу последних.

1. Рябова Т.Ф., Минаева Е.В., Юткина О.В. Перспективы воспроизводства в животноводческой отрасли в России // Пищевая промышленность, – 2018. №8. С. 49-51.

2. Robert B. Gilchrist, Jeremy G. Thompson Oocyte maturation: Emerging concepts and technologies to improve developmental potential in vitro // Theriogenology, – 2007, V. 67, I. 1, P. 6-15. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2006.09.027.

3. Шульгин, И. К. Сравнение методик выделения ооцит-кумулюсных комплексов из яичников животных после овариоэктомии / И. К. Шульгин, Л. Н. Ротарь, В. Д. Шульгина // Известия Санкт-Петербургского государственного аграрного университета. – 2023. – № 2(71). – С. 114-120. – DOI 10.24412/2078-1318-2023-2-114-120.

4. Михайлова Н.Д. Дозревание ооцитов in vitro / Михайлова Н.Д., Мишиева Н.Г., Кириллова А.О., Мартазанова Б.А., Джинчарадзе Л.Г. // Акушерство и гинекология – 2021, – № 11. C. 64-70. DOI 10.18565/aig.2021.11.

5. Ali A., Benkhalifa M., Miron P., In-vitro maturation of oocytes: biological aspects // Reproductive BioMedicine, – 2006, V. 13, I. 3, P. 437-446. https://doi.org/10.1016/S1472-6483(10)61450-2.

6. Alberto Maria L. Marc-André S. Successful in vitro maturation of oocytes: a matter of follicular differentiation // Biology of Reproduction, – 2017, V. 98, I. 2, P. 162- 169. https://doi.org/10.1093/biolre/iox149.

7. Сметанина И.Г., Татаринова Л.В. Влияние сыворотки крови на созревание ооцитов и развитие эмбрионов крупного рогатого скота in vitro // Проблемы биологии продуктивных животных - 2018. №3. C. 45-53.

8. Сингина Г.Н., Шедова Е.Н. Дозревание ооцитов коров в среде fert-talp повышает их качество и компетентность к развитию in vitro // Сельскохозяйственная биология, - 2019, т.54, № 6. C. 1206-1213.

9. Голубец Л.В. Эффективность использования эстральной сыворотки в культуральных системах in vitro / Голубец Л.В., Старовойтова М.П., Отрощенко А. Е. // Зоотехническая наука Беларуси, - 2009.- т.44, №1. С. 37-44.

10. Ахмолдаева А. М. Созревание и оплодотворение in vitro ооцитов крупного рогатого скота при действии биологически активных веществ/А. М. Ахмолдаева, Н. И. Сергеев, И. А. Порфирьев // Сельскохозяйственная биология – 2003. – № 6. С. 58-65.

11. Голубец Л.В., Леткевич Л.Л., Ганджа А.И., Симоненко В.П. Эффективность использования энергетических и гормональных добавок при получении эмбрионов крупного рогатого скота вне организма / Голубец Л.В., Леткевич Л.Л., Ганджа А.И., Симоненко В.П.// Зоотехическая наука Беларуси, - 2003. - том 3. – С. 27-32.

12. Баковецкая О. В. Закономерности и механизм функционирования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса и разработка метода определения оптимального времени осеменения. Докторская диссертация, 2006, Рязань. 13. Naoko Kubo, Ilse Silvia Cayo-Colca. Effect of estradiol-17β during in vitro growth culture on the growth, maturation, cumulus expansion and development of porcine oocytes from early antral follicles. Takashi Miyano Anim Sci J. – 2015. - № 86(3). P. 251-259. DOI: 10.1111/asj.12283.

13. Beker 1, Colenbrander B, Bevers M. Effect of 17beta-estradiol on the in vitro maturation of bovine oocytes Theriogenology 2002 Dec;58(9). P. 1663-1673

14. Yon Soepri Ondho, Daud Samsudewa, Dela Ayu Lestari in vitro Maturation of Ovine Oocytes Using Follicle Stimulating Hormone (FSH), Estradiol-17β, and CoCulture of Fallopian Tube Epithelial Cells (FTEC) in Tissue Culture Medium-199 (TCM-199) Int J Vet Sci, 2020, 9(1). P. 66-71.