Эффективность методов культивирования эмбрионов кошачьих в зависимости от сроков их получения после овариоэктомии

В настоящее время ВРТ развиваются быстрыми темпами у многих видов животных. Выделение ОКК из ткани яичника дает возможность получения in vitro эмбрионов для дальнейшего их культивирования. Соответственно, культивирование эмбрионов in vitro, дает шансы получать потомство у животных даже после их гибели. Использование гамет домашних кошек в качестве модели, позволяет усовершенствовать технику получения эмбрионов, которая может быть применима и к диким животным семейства кошачьих, находящихся под угрозой исчезновения. Целью нашего исследования служило: используя яичники кошек после проведения плановой овариогистерэктомии, оценить критичность температурного режима и временного интервала при транспортировке гонад в лабораторию до выделения ОКК. Параметром оценки служил процент получения ооцитов на стадии МII, эмбрионов на стадии морулы и бластоцисты. Метод получения ОКК, культивирование ооцитов и эмбрионов был одинаков во всех группах. Результаты показывают, что лучшие значения достигнуты при поступлении яичников в лабораторию при температуре 25 °С и взятии их в работу в течение от 1 часа до 4 часов, а увеличение времени и снижение температуры негативно влияет на компетентность к развитию ОКК. Исследование проведено на материале, полученном при плановой овариогистерэктомии 12 кошек и орхидэктомии 5 котов. В результате работы модифицирована, применительно к кошачьим, методика транспортировки гонад в лабораторию, позволяющая получить достаточное количество ОКК для последующего культивирования и оплодотворения in vitro. Разработана технология коллекционирования ооцитов и сперматозоидов кошачьих. Усовершенствован способ проведения ЭКО и культивирования эмбрионов. На основании проведенных исследований, разработан алгоритм получения качественных эмбрионов кошачьих как для дальнейшего эмбриотрансфера, так и для проведения витрификации.
Сокращения: ОКК – ооцит-кумулюсный комплекс, ЭКО - экстракорпоральное оплодотворение, ВРТ - вспомогательные репродуктивные технологии, ОВГЭ – овариогистерэктомия.

1. Шульгин И.К., Ротарь Л.Н., Шульгина В.Д. Сравнение методик выделения ооцит-кумулюсных комплексов из яичников животных после овариоэктомии // Разведение, селекция, генетика и биотехнология животных. 2023. P. 114–120.

2. Kamoshita K. et al. Investigation of in vitro parameters and fertility of mouse ovary after storage at an optimal temperature and duration for transportation // Hum. Reprod. 2016. Vol. 31, № 4. P. 774–781.

3. Matsushita S. et al. Effect of lowtemperature bovine ovary storage on the maturation rate and developmental potential of follicular oocytes after in vitro fertilization, parthenogenetic activation, or somatic cell nucleus transfer // Anim. Reprod. Sci. 2004. Vol. 84, № 3–4. P. 293–301.

4. Pedersen H.G., Watson E.D., Telfer E.E. Effect of ovary holding temperature and time on equine granulosa cell apoptosis, oocyte chromatin configuration and cumulus morphology // Theriogenology. 2004. Vol. 62, № 3–4. P. 468–480.

5. Love L.B. Effect of ovary storage and oocyte transport method on maturation rate of horse oocytes // Theriogenology. 2003. Vol. 59. P. 765–774.

6. Wongsrikeao P. Effects of Ovary Storage Time and Temperature on DNA Fragmentation and Development of Porcine Oocytes // J. Reprod. Dev. 2005. Vol. 51, № 1. P. 87–97.

7. Wolfe B.A. Development to blastocysts of domestic cat oocytes matured and fertilized in vitro after prolonged cold storage // J. re. 1996. № 106. P. 135–141.

8. Зиновьева, Н. А. Вспомогательные репродуктивные технологии: история становления и роль в развитии генетических технологий в скотоводстве (обзор) / Н. А. Зиновьева, С. В. Позябин, Р. Ю. Чинаров // Сельскохозяйственная биология. – 2020. – № 2. – С. 225-242.

9. Луканина, В.А. Сравнительное исследование результативности лапаротомического и лапароскопического методов трансплантации клонированных эмбрионов у овец / В. А. Луканина, Р. Ю. Чинаров, С. В. Позябин [и др.] // Достижения науки и техники АПК. – 2023. – Т. 37, № 3. – С. 39-43.