Сравнение биологической активности in vitro секретомов мезенхимальных стволовых клеток, выделенных из жировой ткани лошади

Сегодня в регенеративной медицине, традиционно опиравшейся на терапию стволовыми клетками, происходит переход к новому типу биологической регуляции, основанному на межклеточном взаимодействии через секретируемые вещества, известные как секретом. Применение секретома мезенхимальных стволовых клеток (МСК) в регенеративной терапии обладает рядом преимуществ по сравнению с использованием живых клеток, включая возможность модификации состава секретома для достижения определенных терапевтических целей. В настоящем исследовании впервые описана процедура получения секретома мезенхимальных стволовых клеток лошади с использованием двух отличных методов и проведено сравнительное изучение их биологической активности на модели «раны» in vitro. С помощью программы ToupView 3.7. на фотографиях измеряли ширину «раны» в каждой из 6 точек для каждой лунки через 0 часов инкубирования (сразу после нанесения «царапины») и 24 ч инкубирования. Рассчитывали среднее значение ширины просвета «царапины» в 0ч и 24 ч. Затем рассчитывали отношение средней ширины «царапины» через 24 часа инкубирования к среднему значению ширины «царапины» через 0 часов инкубирования, после чего рассчитывали для каждого образца «степень зарастания раны по отношению к «К». Результат выражали в % по отношению к контролю. Впервые проведена оценка стабильности биологической активности секретома МСК при хранении в температурном диапазоне от +4 до +8^оС на протяжении двух месяцев. На основании результатов проведенных исследований будет выбран секретом МСК, являющийся перспективным кандидатом для дальнейших испытаний: сначала на лабораторных животных с целью оценки безопасности при различных путях введения, а затем на лошадях для анализа его влияния на показатели сердечно-сосудистой и дыхательной систем при патологических состояниях как в покое, так и после физической нагрузки.

1. Мезенхимальные стволовые клетки в процессах роста и репарации тканей/ Н.И. Калинина, В.Ю. Сысоева, К.А. Рубина, [и др.] // Acta Naturae. - 2011. - Т.3. - №4. - С. 32-39.

2. Mesenchymal stem cell secretome: toward cell-free therapeutic strategies in regenerative medicine / Vizoso F.J., Eiro N., Cid S. [et al.]. // Int J Mol Sci. - 2017. - 18(9). - Р. 1852.

3. MacDonald, E.S. The Potential of Mesenchymal Stem Cells to Treat Systemic Inflammation in Horses / E.S. MacDonald, J. G. Barrett // Frontiers in Veterinary Science. – 2020. – V. 6. – Р. 507.

4. Лаврик, А. А. Иммуномодулирующие свойства мезенхимальных стволовых клеток: актуальные исследования / А. А. Лаврик, А. В. Трифонова, П. И. Токарь // Наука и инновации - современные концепции: сборник научных статей по итогам работы Международного научного форума, Москва, 21 сентября 2023 года. – Москва: Инфинити, 2023. – С. 83-88.

5. Регенеративная медицина для лечения лошадей с респираторными заболеваниями / А. В. Травкина, С. Ю. Концевая, А. А. Лаврик, С. Г. Али // Инновационные решения актуальных проблем в области ветеринарии : материалы Всероссийской (национальной) научно-практической конференции, Курск, 25–26 февраля 2021 года. – Курск: Курская государственная сельскохозяйственная академия имени И.И. Иванова, 2021. – С. 259-263.

6. Патент № 2662172 C2 Российская Федерация, МПК A61K 35/28. Способ получения регенеративного ветеринарного препарата на основе экстракта мезенхимальных стволовых клеток и кондиционной среды: № 2016148715: заявл. 13.12.2016: опубл. 24.07.2018 / А. А. Лаврик, Н. Э. Искендерова, С. Г. Али.

7. A high-throughput cell migration assay using scratch wound healing, a comparison of image-based readout methods / J.C.Yarrow, Z.E.Perlman, N.J. Westwood, T.J. Mitchison // BMC Biotechnol. - 2004. - V 9. - № 4. – P 21.