Определение маркера виментина в плаценте коров в норме и при задержании последа

Современные молочные предприятия несут финансовые убытки в виду высокой заболеваемости дойного стада после отела. В текущем исследовании представлено распределение внеклеточного матрикса соотношения мезенхимальных элементов плаценты у коров при физиологических и осложненных родах с задержанием последа. Ткани карункулов и котиледонов собирали каждые 6 часов после спонтанных родов до высвобождения плодных оболочек. В зависимости от времени высвобождения плодных оболочек после родов образцы были классифицированы следующим образом: 1 - контрольная группа, в которой плодные оболочки высвобождались в течение 6 часов после родов, считались завершёнными, спонтанными и физиологическими (Partus normalis); 2 - опытная группа, в которой плодные оболочки высвобождались через 9-12 часов после выведения плода, роды считали патологическими с задержанием последа (Retenzio sekundarium). Выявление изменений в содержании виментин - содержащих элементов предполагает разработку системы экспресс-диагностики репродуктивных патологий у крупного рогатого скота молочного направления в родах и после отела. Образцы плаценты коров при физиологических родах, и задержанием последа подвергали стандартным гистологическим процедурам. Парафиновые срезы плаценты толщиной 5 мкм, монтировали на стекла, обработанные поли-L-лизином («Menzel»). С помощью иммуногистохимического и иммунофлуоресцентного окрашивания изучали иммунолокализацию антител к виментину используя клон EPR3776 (кроличьи, моноклональные, Тайвань, GeneTex, Int. Corp). Изучена локализация содержания промежуточных филаментов мезенхимального фенотипа в плаценте коровы при которой выявили присутствие большого количества мелких капилляров как в ворсинах котиледонов, так и в карункулярных криптах при беременности и родах в норме, а также равновесное соотношение мезенхимальных структур в плаценте. В родах, осложненных задержанием последа, продемонстрировано снижение васкуляризации ворсин хориона в котиледонах и деградация филаментов, участвующих в формировании клеточных контактов между цитотрофобластами ворсин хориона котиледонов фетальной части плаценты и эндотелио-, эпителиоцитами крипт карункулов материнской части плаценты. Выраженная экспрессия виментина была обнаружена в клетках, выстилающих крипты карункулов, а также в цитоплазматической мембране цитотрофобластов ворсин. Изучение соотношения мезенхимальных элементов с использованием иммунофлуоресцентного метода окрашивания антител к виментину показало, что значительное снижение их как в цитотрофобластах котиледонов, так и в эпителиоцитах карункулов наблюдается в плаценте коров при развитии состояния плацентарной недостаточности, приводящей к осложнению родов задержанием последа. Настоящее исследование предоставляет первые доказательства того, что виментин экспрессируется в плацентомах крупного рогатого скота в гестационный, предродовой и родовой периоды, и предполагает, что этот филамент возможно в сочетании со стериодогенными гомонами опосредует отделение плодной части плаценты от материнской.

1. Делекторская В.В., Чемерис Г.Ю., Смирнова Е.А. Иммуногистохимический анализ аберрантной экспрессии виментина в карциноидных опухолях легкого. Успехи молекулярной онкологии 2018;5 (4):104–109. DOI: 10.17650/2313-805X-2018-5-4-104-109.

2. Новиков В.Д., Ясакова Н.Т., Авдеенко B.C., Машак C.B., Цыцорина Т.Н., Герасимова Ю.В. Эпителиостромальные взаимоотношения в котиледонной плаценте жвачных в нормальных и патологических условиях // Морфология. - 1992. - Л 1. - С. 97-10З.

3. Приходько С. А., Родин П.В., Авдеенко В.С., Племешов К.В. Мормфогенез плаценты у крупного рогатого скота при эклампсии. // Вопросы нормативноправового регулирования в ветеринарии. 2020, №1, С. 117-121.

4. Li H, Dai H, Li J. Immunomodulatory properties of mesenchymal stromal/stemcells: The link with metabolism. J Adv Res (2023) 45:15–29. doi: 10.1016/j.jare.2022.05.012

5. Tavares Farias S.F.S., Barbosa H.T.S., Xavier Júnior F.A.F., Monteiro Evangelista J.S.A., Machado da Silva L.D. Macro and microscopic characteristics of the placenta and its relationship with the weight and the Apgar score of canine neonates. // Theriogenology. V.202, 2023, p. 21-27.

6. Castro C., Diessler M., Barbeito C., Merkis C. Caracterizacion del vascular y estúdio de la angiogenesis em la placenta de la gata. // Investigación Joven, 7 (2) (2020), pp. 453-454

7. G. Sarli, C. Castagnetti, C. Bianco, G. Ballotta, G. Tura, M. Caporaletti, D. Zambelli. Canine placenta histological findings and microvascular density: the histological basis of a negative neonatal outcome? // Animals, 11 (5) (2021), p. 1418, 10.3390/ani11051418

8. Tesi M., Miragliotta V., Scala, Aronica E., Lazzarini G., Fanelli D., Rota A., Abramo F. Gross and histological findings in the canine placenta and amnion at term: what's normal, abnormal or pathological? // Reprod Domest Anim, 56 (5), 2021, pp. 691-702, 10.1111/rda.13905

9. Gomes M.T., Palasiewicz K., Gadiyar V., Lahey K., Calianese D., Birge R.B., et. al., Phosphatidylserine externalization by apoptotic cells is dispensable for specific recognition leading to innate apoptotic immune responses. J. Biol Chem (2022) 298 (7):102034. doi: 10.1016/j.jbc.2022.102034

10. Tesi M., Miragliotta V., Scala L., Aronica E., Lazzarini G., Fanelli D., Abramo F., Rota A. Relationship between placental characteristics and puppies' birth weight in toy and small sized dog breeds. // Theriogenology, 141. - 2020, pp. 1-8.

11. Galderisi U., Peluso G., Di Bernardo G. Clinical trials based on mesenchymalstromal cells are exponentially increasing: where are we in recent years? Stem Cell Rev Rep (2022) 18(1):23–36. doi: 10.1007/s12015-021-10231-w

12. Jiang P., Zhang Y., Ru B., Yang Y., Vu T., Paul R., et. al. Systematic investigation ofcytokine signaling activity at the tissue and single-cell levels. Nat Methods (2021) 18 (10):1181–91. doi: 10.1038/s41592-021-01274-5

13. Calianese D.C., Birge R.B. Biology of phosphatidylserine (PS): basic physiologyand implications in immunology, infectious disease, and cancer. Cell Commun Signal (2020) 18(1):41. doi: 10.1186/s12964-020-00543-8

14. Reddoch-Cardenas K.M., Peltier G.C., Chance T.C., Nair P.M., Meledeo M.A., Ramasubramanian A.K, et. al. Cold storage of platelets in platelet additive solution maintains mitochondrial integrity. by limiting initiation of apoptosis-mediated pathways. Transfusion (2021) 61(1):178–90. doi: 10.1111/trf.16185

15. Иммунофлуоресцентный анализ экспрессии виментина в эпителиальных клетках / Т. А. Богуш, С. А. Калюжный, А. А. Башарина [и др.] // Вестник Московского университета. Серия 2: Химия. – 2019. – Т. 60, № 6. – С. 384-391.