Идентификации salmonella enteritidis и salmonella typhimurium методом полимеразно цепной реакции

На территории Российской Федерации продолжают отмечаться вспышки сальмонеллеза. Каждый год обычно фиксируется приблизительно 50000 ситуации сальмонеллеза людей. Смертельность от данной инфекции, может составлять 0,02-0,04 на 100 тыс. жителей. Из имеющихся на территории РФ сероваров сальмонелл, преобладающую роль отводят S. Enteritidis - 85% далее следует S. Typhimurium - 12% , S. Infantis - 10% и другие - 6%. В основном S. Enteritidis, S. Typhimurium, S. Infantis, S. Gallinarum-pullorum чаще всего выделяют от птиц Задачей настоящего исследования является разработка уникальных образцов олигонуклеотидных последовательностей позволяющих обнаружить ДНК микроорганизмов рода Salmonella. Серовары сальмонелл трудно генетически типировать из-за их высокой степени идентичности. Исследования проведенные в изучении условий патогенности сальмонелл показали, что для идентификации штаммов сальмонелл молекулярно -генетическим методом могут быть использованы в качестве мишеней области островков патогенности. Проанализировав публикации нами были выбраны области гена invA по генетическому маркеру - гену spvA с целью получения уникальные последовательности сиквенсов для серовариантов S. Typhimurium, S. Enteritidis. Сиквенсы генов invA и sefA выравнивали подбирая схожие у абсолютно всех серовариантов сальмонелл части, локализующиеся в первой половине гена. С помощью программы BLAST на сервере NCBI была оценена специфичность подобранных праймеров. В результате поиска в базе данных последовательностей GenBank выявлена 100% гомология выбранных праймеров лишь с гомологичными последовательностями в геноме S. Typhimurium, S. Enteritidis. Исследование проб, содержащих патологические агенты бактериальной природы методом ПЦР, подтвердило специфичность выбранных праймеров. Положительные результаты были получены только с пробами, содержащими S. Typhimurium, S. Enteritidis. Таким образом, подобранные праймеры могут быть предложены для исследования проб разного состава для выявления геномов S. Typhimurium, S. Enteritidis.

сальмонеллез, пт ица, праймеры, диагност ика, молекулярно-генетические исследования, ПЦР, salmonellosis, poultry, primers, diagnostics, molecular genetic studies, PCR

1. Антигенные формулы сероваров сальмонелл / Под ред.П.А.Д. Гримонт. Ф. -КсВейль, 9-е издание - Тверь: ООО издательство «Триада» 2012. - 148с.

2. Павлов С. И. Мониторинг и совершенствование специфической профилактики сальмонеллеза свиней и птиц // Дис. канд. биол. наук., Оболенск, 2004. - 105 c.

3. Погосян А. А. Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса птицы и профилактика пищевых сальмонеллезов // Автореф. дис. кандидата вет. наук. - СПб, 2011. - 23 с.

4. Чугунова E.О., Татарникова Н.А., Прохорова Т.С., Мауль О.Г. Зараженность сальмонеллами продукции птицеводства // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - № 6.

5. Яцышина С.Б. Выявление и типирование возбудителей сальмонеллеза молекулярно-генетическим методом. // Автореф. дисс. на соискание учен. степени канд. биол. наук., М., 2003, - с.- 18.