Применение конъюгата на основе коллоидного золота для экспресс-диагностики бешенства в дот-иммуноанализе

Целью исследований явилась разработка прямого дот-иммуноанализа на нитроцеллюлозной мембране (НЦМ) с использованием конъюгата на основе коллоидного золота для качественного определения наличия антигена вируса бешенства в патологическом материале. В качестве исследуемых образцов использовали пробы головного мозга (ГМ) разных видов животных, явившиеся положительными при первичном исследовании методами флуоресцирующих антител: лисиц и мышей. РИФ и непрямой «сэндвич»-ИФА (иммуноферментный анализ) проводили с использованием диагностических наборов изготовленных в ФГБНУ «ФЦТРБВНИВИ». В материалах представлены результаты первичных лабораторных испытаний тест-системы для индикации рабического антигена на основе прямого дот-иммуноанализа (ДИА) 81 образца патологического материала, головного мозга разных видов животных. Показано, что ДИА обладает 100% специфичностью, а его оптические сигналы коррелируют с результатами непрямого ИФА. Предложенный метод ДИА, помимо самостоятельного применения, может также послужить базисом для конструирования тест-систем на основе иммунохимического анализа (ИХА).

1. Ахмадеев, Р. М. Получение антигена вируса бешенства методом трёхфазной экстракции / Р.М. Ахмадеев, А.Г. Мухамеджанова, Н.Р. Мифтахов и др. // Ветеринарный врач. – 2020. – № 5. – С. 26-33. https://doi.org/10.33632/1998-698X.2020-5-26-33

2. Ахмадеев, Р. М. Применение дотиммуноанализа для индикации рабического антигена в патологическом материале / Р. М. Ахмадеев, А. Ф. Арсланова, Н. Р. Мифтахов, Ш. М. Насыров, М. А. Ефимова, И. И. Самерханов // Ветеринарная патология. – 2021. – № 2. – С. 21-27.

3. Богатырёв, В. А. Методы синтеза наночастиц с плазмонным резонансом / В. А. Богатырёв, Л. А. Дыкман, Н. Г. Хлебцов // Учебное пособие. – СГУ им. Н. Г. Чернышевского. – 2009. – 35 с.

4. Ефимова, М.А. Оценка пригодности выделенных антирабических иммуноглобулинов для методов лабораторной диагностики: ИФА и МФА / М. А. Ефимова, А. Г. Мухамеджанова, А. Н. Чернов и др. // Ветеринарный врач. – 2018. – № 4. – С. 3-7.

5. Загоскина, Т. Ю. Дот-иммуноанализ с использованием антител, меченных наночастицами коллоидного золота, для детекции ботулинического токсина в клиническом материале и пищевых продуктах / Т. Ю. Загоскина, Е. Л. Чапоргина, Е. Ю. Марков и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. – 2017. – № 4. – С. 31-35.

6. Недосеков, В. В. Сравнительная оценка методов лабораторной диагностики бешенства / В. В. Недосеков // Ветеринарная патология. – 2002. – № 1. – С. 41-47.

7. Шарапова, Н. А. Выделение гликопротеида из фиксированного штамма вируса бешенства «Москва 2532» и конструирование на его основе диагностикума для дот-иммуноанализа / Н. А. Шарапова, М. Н. Киреев, Е. Г. Абрамова и др. // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. – 2012. – № 5 (87), 1. – С. 347-350.

8. Léchenne, M. Validation of a Rapid Rabies Diagnostic Tool for Field Surveillance in Developing Countries / M. Léchenne, K. Naïssengar, A. Lepelletier, I. O. Alfaroukh, H. Bourhy // PLoS Negl Trop Dis. – 2016. – 10(10):e0005010. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005010.

9. Mahadevan, A. Perspectives in Diagnosis and Treatment of Rabies Viral Encephalitis / A. Mahadevan, M. S. Suja, R. S. Mani, S. K. Shankar // Insights from Pathogenesis. Neurotherapeutics. – 2016. – 13(3). – P. 477-92. https://doi.org/10.1007/s13311-016-0452-4.

10. Nadyrova, A. I. Obtaining rabies virus purified antigen / A. I. Nadyrova, M. A. Efimova, A. G. Mukhamedzhanova et al. // Asian Journal of Pharmaceutics. – 2018. – № 12 (4). – P. 1299-1303.