Идентификация и пробиотические свойства лактобактерий из кишечника цыплят-бройлеров

Объектами исследования данной работы были выбраны следующие штаммы: Pediococcus acidilactici, Lactobacillus johnsonii и Ligilactobacillus salivarius, выделенные из фекалий цыплят-бройлеров возрастом 14 суток. Навеску фекалий цыплят-бройлеров помещали в стерильную питательную среду MRS (HiMedia, Индия) и инкубировали при температуре 37 ˚С в течение 24 часов. После этого анализируемые образцы пересевали глубинно на питательную среду MRS–агар («НПЦ «Биокомпас-С», Россия) методом предельных разведений для выделения отдельных колоний микроорганизмов. Чашки Петри с посевами инкубировали в течение 48 часов при 37 ˚С. Выросшие колонии микроорганизмов идентифицировали по культуральным и морфологическим признакам для дальнейшего секвенирования. Изучена устойчивость данных культур к желчным кислотам, проведена оценка их антагонистической активности, толерантности к экстремально низким и высоким значениям рН, а также проведен анализ их устойчивости к разным группам антибиотиков. L. salivarius оказался наиболее устойчивым к желчи по сравнению с L. johnsonii и P. acidilactici. Антагонистического действия по отношению к нормальной микробиоте желудочно-кишечного тракта P. acidilactici не проявил, в отличие от других анализируемых штаммов, но оказал существенное влияние в отношении условно-патогенных бактерий. Экс тремально низкие и высокие значения рН не провоцировали полную гибель P. acidilactici, тогда как L. salivarius и L. johnsonii не сохранили активность при экстремально низких значениях рН. Также в ходе эксперимента было выявлено, что L. johnsonii оказался наиболее антибиотикочувствительным штаммом.

1. Aidara-Kane A., Angulo F. J., Conly J., Minato Y., Sil-bergeld E. K., McEwen S. A., et al. World Health Organization (WHO) guidelines on use of medically important anti-microbials in food-producing animals. Antimicrob. Resist.Infect. Control 7:7. doi: 10.1186/s13756-017-0294-9.

2. Гладких М. И., Нестерова Е. Ю., Сыромятников М. Ю., Михайлов Е. В., Попов В. Н. Идентификация генов антибиотикорезистентности в молоке // Ветеринарный фармакологический вестник. — 2022 — № 1(18). – C. 69-73

3. Зубарева В. Д., Безбородова Н. А., Соколова О. В., Исаева А. Г., Лысова Я. Ю., Суздальцева М. А., Васильева А. Н. Определение антибиотикорезистентности Pseudomonas aeruginosa, выделенных из биологических образцов и окружающей среды молочно-товарных предприятий Свердловской области // Ветеринарный фармакологический вестник. — 2022 — № 2 (19). — C. 58—64.

4. Долов М. Качество мяса бройлеров кросса «CK Русь-4» [Текст] /М. Долов, Р. Абдулхаликов, О. Гетоков // Птицеводство - 2010 - №5 - С. 33 -35.

5. Ноздрин Г.А. Пробиотики и микронутриенты при интенсивном выращивании цыплят кросса Смена [Текст] / Г.А. Ноздрин, А.Б. Иванова, А.И. Шевченко, С.А. Шевченко. - Новосибирск: НГАУ, 2009. - 207 С.

6. Тараканов Б.В. Микрофлора кишечника, иммунный статус и продуктивность цыплят-бройлеров при включении в рацион пробиотика микроцила [Текст] / Б.В. Тараканов, Т.А. Николичева, А.И. Манухина и др. // С.-х. биология. - 2007. - № 2. - С. 87-93.

7. Lutful Kabir, S.M., 2009. The role of probiotics in the poultry industry. International Journal of Molecular Sciences 10, 3531-3546.

8. Rosmini, M.R., Sequeira, G.J., GuerreroLegarreta, I., Martí, L.E., Dalla-Santina, R., Frizzo, L., Bonazza, J.C., 2004. Producción de probióticos para animales de abasto: importancia del uso de la microbiota intestinal indígena. Revista Mexicana de Ingeniería Química 3, 181-191.

9. Asahara T, Shimizu K, Nomoto K, Hamabata T, Ozawa A, Takeda Y. Probiotic bifidobacteria protect mice from lethal infection with Shiga toxin-producing Escherichia coli O157:H7. Infect Immun. 2004 Apr;72 (4):2240-7.

10. Maqueda M, Sánchez-Hidalgo M, Fernández M, Montalbán-López M, Valdivia E, Martínez-Bueno M. Genetic features of circular bacteriocins produced by Grampositive bacteria. FEMS Microbiol Rev. 2008 Jan;32(1):2-22. doi: 10.1111/j.1574-6976.2007.00087.x. Epub 2007 Nov 20. PMID: 18034824.

11. Frizzo, L.S., Bertozzi, E., Soto, L.P., Sequeira, G., Rodriguez Armesto, R., Rosmini, M.R., 2010. Studies on translocation, acute oral toxicity and intestinal colonization of potentially probiotic lactic acid bacteria administered during calf rearing. Live Stock Science 128, 28-35.

12. Yang, J., Wang, J., Liu, Z. et al. Ligilactobacillus Salivarius improve body growth and anti-oxidation capacity of broiler chickens via regulation of the microbiota-gut -brain axis. BMC Microbiol 23, 395 (2023).

13. Kim S.-Y., Adachi Y. Biological and genetic classification of canine intestinal lactic acid bacteria and bifidobacteria. Microbiol. Immunol. 2007;51:919–928.

14. Carina Audisio M., Torres M.J., Sabaté D.C., Ibarguren C., Apella M.C. Properties of different lactic acid bacteria isolated from Apis mellifera L. Bee-gut. Microbiol. Res. 2011;166:1–13. doi: 10.1016/j.micres.2010.01.003.

15. Duar R.M., Lin X.B., Zheng J., Martino M.E., Grenier T., Pérez-Muñoz M.E., Leulier F., Gänzle M., Walter J. Lifestyles in Transition: Evolution and Natural History of the Genus Lactobacillus. FEMS Microbiol. Rev. 2017;41:S27–S48. doi: 10.1093/femsre/fux030.

16. Andrada E., Mechoud M.A., AbeijónMukdsi M.C., Chagra Dib E.P., Cerviño S., Perez Chaia A., Medina R.B. Ferulic acid esterase producing Lactobacillus johnsonii from goat feces as corn silage inoculants. Microorganisms. 2022;10:1732. doi: 10.3390/microorganisms10091732.

17. Mager L.F., Burkhard R., Pett N., Cooke N.C.A., Brown K., Ramay H., Paik S., Stagg J., Groves R.A., Gallo M., et al. Microbiome -derived inosine modulates response to checkpoint inhibitor immunotherapy. Science. 2020;369:1481–1489. doi: 10.1126/science.abc3421.

18. Tao S, Fan J, Li J, Wu Z, Yao Y, Wang Z, Wu Y, Liu X, Xiao Y, Wei H. Extracellular vesicles derived from Lactobacillus johnsonii promote gut barrier homeostasis by enhancing M2 macrophage polarization. J Adv Res. 2024 Mar 18:S2090-1232(24) 00111-5.

19. Khurajog B, Disastra Y, Lawwyne LD, et al. Selection and evaluation of lactic acid bacteria from chicken feces in Thailand as potential probiotics. PeerJ. 2023;11:e16637. doi: 10.7717/peerj.16637.

20. Никифорова А. П., Хамагаева И. С. Изучение пробиотического потенциала штаммов молочнокислых бактерий Latilactobacillus sakei // Вестник ЮУрГУ. Серия «Пищевые и биотехнологии». 2022. — Т. 10, № 2. — С. 15—21. doi: 10.14529/food220202

21. Пеньдюхова А. С., Белькова Н. Л., Савинова Ю. С., Воропаева Н. М., Смурова Н. Е., Клименко Е. С., Кондратов И. Г., Семенова Н. В., Рычкова Л. В. Пробиотические консорциумы: структура и антагонистическая активность в отношении условно-патогенных бактерий и нормобиоты человека (на примере Escherichia coli) in vitro // Acta biomedica scientifica. — 2023. — Т. 8, № 4. — С. 20—31. doi: 10.29413/ABS.2023- 8.4.3.

22. Mitsuoka, T., 2002. Research in intestinal flora and functional foods. International Journal of Microbiology 15, 57-89.

23. Jin, L.Z., Ho, Y.W., Abdullah, L., Jalaludin, S., 1998. Acid and bile tolerance of Lactobacillus isolated from chicken intestine. Letters in Applied Microbiology 23, 183-185.

24. Perry J., Waglechner N., Wright G. The Prehistory of Antibiotic Resistance. Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2016.

25. Идентификация и свойства лактобактерий в кишечнике поросят / М. Ю. Сыромятников, С. В. Шабунин, Е. Ю. Нестерова [и др.] // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. – 2024. – № 2(62). – С. 15-19. – DOI 10.24412/2074-5036-2024-262 -15-19.