Исследование мутагенной активности препарата на основе рекомбинантной протеазы микромицета aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D

В данном исследовании нами была оценена мутагенная активность препарата ПАО-1, содержащего в качестве действующего вещества обладающую фибринолитической активностью протеазу микромицета Aspergillus ochraceus ВКМ F4104D, разработанный для терапии заболеваний молочной железы у крупного рогатого скота. Для этого нами было проведено изучение частоты полихроматических эритроцитов с микроядрами в костном мозге белых крыс породы Wistar (n=24). Исследовали цитогенетическую стабильность клеток костного мозга крыс после двух недель ежедневного подкожного введения ПАО-1 в дозах 460 мг/кг и 2300 мг/кг относительно показателей интактных животных и крыс, подвергнутых однократному внутрибрюшинному введению экспериментального мутагена – митомицина С. В результате проведенного исследования нами не было выявлено статистически значимого изменения частоты встречаемости полихроматических эритроцитов с микроядрами, а также доли полихроматических эритроцитов при введении ПАО-1 в обеих исследуемых дозах. Таким образом, нами не было выявлено изменения цитогенетической стабильности в полихроматофильных эритроцитов в костном мозге крыс при двухнедельном подкожном введении рекомбинантной протеазы микромицета Aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D в дозе 460 мг/кг и 2300 мг/кг, относительно показателей интактных животных. Представленные данные могут являться свидетельством отсутствия у исследуемой протеазы мутагенных свойств. Работа выполнена при поддержке РНФ (проект № 20-16-00085).

1. Ramundo J. Enzymatic wound debridement / J. Ramundo, M. Gray. J.W. Ostomy // Continence Nurs. – 2008. – №35(3). – Р.273-280. DOI: 10.1097/01.WON.0000319125.21854.78.

2. Balami J.S.Thrombolytic agents for acute ischaemic stroke treatment: The past, present and future / J.S. Balami, R. Chen, B.A. Sutherland, A.M. Buchan //CNS Neurol. Disord. Drug Targets. – 2013. – Vol. 12(2). – P. 145–154.

3. Osmolovskiy A. A. Secretion of Proteinases with Fibrinolytic Activity by Micromycetes of the Genus Aspergillus. //A. A. Osmolovskiy, E. S. Zvonareva, V. G. Kreyer, N. A. Baranova, and N. S. Egorov// Moscow University Biological Sciences Bulletin. – 2018. – Vol. 73(1). –P. 39–42. DOI: 10.3103/S0096392518010066.

4. Choi J.H. Thrombolytic, anticoagulant and antiplatelet activities of codiase, a bifunctional fibrinolytic enzyme from Codium fragile. / J.H. Choi, K. Sapkota, S.E. Park, S. Kim, S.J. Kim // Biochimie. – 2013. –Vol. 95. – P. 1266–1277. DOI: 10.1016/j.biochi.2013.01.023.

5. Востроилова Г.А. Оценка противовоспалительной активности рекомбинантной протеазы микромицета Aspergillus Ochraceus на лабораторных животных / Г. А. Востроилова, Н. А. Хохлова, Ю. А. Чаплыгина, А. А. Корчагина, Т. И. Ермакова, П. А. Паршин // Ветеринарный фармакологический вестник. – 2020. – № 4(13). – С. 68—72. DOI: 10.17238/issn2541-8203.2020.4.68

6. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. /Под ред. А. Н. Миронова. М.: Гриф и К, 2012.

7. Hayashi M. The micronucleus test—most widely used in vivo genotoxicity test. / M. Hayashi // Genes and Environ. – 2016. –Vol. 38:18 – P. 1-9. DOI: 10.1186/s41021-016-0044-x.

8. Agarwal D.K. An improved chemical substitute for fetal calf serum for the micronucleus test. / D.K. Agarwal, L.K. Chauhan // Biotech. Histochem. –1993. – №68(4). P. 187-188. DOI: 10.3109/10520299309104695.

9. da Silva M.M. Effect of acute exposure in swiss mice (Mus musculus) to a fibrinolytic protease produced by Mucor subtilissimus UCP 1262: An histomorphometric, genotoxic and cytological approach / M.M. da Silva, T.A. Rocha, D.F. de Moura, C.A. Chagas, F.C. de Aguiar, N.P. da Silva Santos, R.V. Da Silva Sobral, J.M. do Nascimento, A.C.L. Leite, L. Pastrana, R.M.P. Brandão Costa, T.P. Nascimento, A.L. Figueiredo Porto / Regul Toxicol Pharmacol. – 2019. – Vol.103. – P.282-291. DOI: 10.1016/j.yrtph.2019.02.009.

10. Wu H. Acute toxicity and genotoxicity evaluations of Nattokinase, a promising agent for cardiovascular diseases prevention / H. Wu, H. Wang, F. Xu, J. Chen, L. Duan, F. Zhang. // Regul Toxicol Pharmacol. – 2019. – Vol. 103. – P. 205-209. DOI: 10.1016/j.yrtph.2019.02.006.