Совершенствование способа культивирования респираторносинцитиального вируса для создания вакцины против респираторных инфекций телят

Целью работы являлось изучение особенностей культивирования и определения инфекционной активности штамма респираторно-синцитиального вируса «РБ23» для дальнейшего создания живой аттенуированной импортозамещающей вакцины против ИРТ, ПГ-3 и РСВ для назальной иммунизации новорожденных телят. Качество репликации на клеточных линиях проводили путем оценки инфекционных титров по прямому цитопатическому действию вируса на клетки млекопитающих, а также использовали метод окрашенных фокусов. Методом количественной ПЦР определена степень репликации РСВ на культуре клеток ЛЭК в зависимости от сроков культивирования. Показано, что клетки ЛЭК и Т-1 являются пермессивными для РСВ. При этом чувствительность клеток ЛЭК превышала чувствительность клеток Т-1 на 1,96, 1,88 и 7,69 % соответственно, в трех последовательных пассажах. Смена среды МЕМ с добавлением глутамина при культивировании РСВ на 4 сутки способствовала усилению репликативной активности на 8,6 % по сравнению с флаконами, в которых смена среды не проводилась. Отмечено также, что оптимальным сроком культивирования РСВ является срок семь суток, дальнейшее культивирование приводит к деградации внеклеточных вирусных частиц, что снижает концентрацию вирионов на 26,5-40,0 %. Наработана биомасса РСВ «РБ23» для дальнейшего создания живой аттенуированной импортозамещающей вакцины против ИРТ, ПГ-3 и РСВ для назальной иммунизации новорожденных телят с инфекционным титром РСВ – 4,75±0,18 lg ТЦД ₅₀/см³, титром по ФОЕ – 1,5x10⁶ ФОЕ/см3 и количеством вирионов в вируссодержащей суспензии не ниже 4,5±0,20 млн. копий/мл.

1. Распространение респираторно-синцитиальной вирусной инфекции КРС на территории ряда регионов Российской Федерации / С. А. Андреев, А. В. Кононов, А. А. Нестеров, Е. А. Бухон, К. А. Шалина // Молодые ученые - науке и практике АПК : Материалы Международной научно-практической конференции аспирантов и молодых ученых, Витебск, 25–26 апреля 2024 года. – Витебск: Витебская государственная академия ветеринарной медицины, 2024. – С. 21–23.

2. Респираторно-синцитиальная инфекция крупного рогатого скота: особенности клинического проявления, патогенеза и молекулярной эпизоотологии (обзор) / С.В. Котенева, А.Г. Глотов, Т.И. Глотова [и др.] // Ветеринария сегодня. – 2025. – № 14(2). – С. 133-139. https://doi.org/10.29326/2304-196X-2025-14-2-133-139.

3. Изучение антигенных свойств ассоциированной вакцины против ИРТ, ВД-БС, ПГ-3 и хламидиоза крупного рогатого на кроликах / И. Р. Акбашев, С. В. Садыкова, Л. М. Яшагина [и др.] // Ветеринарный врач. – 2024. – № 2. – С. 39–42. https://doi.org/ 10.33632/1998-698X_2024_2_39.

4. Bovine respiratory disease during the midportion of the feeding period: Observations from vaccination history, viral and bacterial prevalence, and rate of gain in feedlot cattle / M. E. Theurer, M. D. Johnson, T. Fox [et al.] // Appl. Anim. Sci. – 2021. – № 37. – Р. 59–67. https://doi.org/10.15232/aas.2020-02090

5. Культуральные свойства вируса респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота штамма «АБ 1908» / В.В. Кирпиченко, C.В. Кононова, А.В. Кононов [и др.] // Ветеринария сегодня. – 2019. – № 4. С. 31-36. https://doi.org/10.29326/2304-196X-2019-4-31-31-36

6. Коровкин А.С., Горенков Д.В., Волгин А.Р. Профилактика респираторно-синцитиальной вирусной инфекции: современное состояние и перспективы разработки вакцин // БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. – 2024. – № 24(3). – С. 255–269. https://doi.org/10.30895/2221-996X-2024-24-3-255-26

7. Vaccination of calves at day of birth with attenuated vaccines against bovine respiratory syncytial virus, bovine parainfluenza type 3 virus and respiratory bovine coronavirus / M. H. van Rooij, M. Schmitz, J. M. H. Meessen [et al.] // Veterinary Vaccine. – 2023. – Vol. 2 (1). – 100014. https://doi.org/10.1016/j.vetvac.2023.100014

8. Comparative effectiveness of intranasal and parenteral vaccines for prevention of bovine respiratory disease in feedlot heifers / J. I. Szasz, T. C. Bryant, K. S. Blood [et al.] // Applied Animal Science. – 2023. – Vol. 39 (5). – P. 273–281. https://doi.org/10.15232/aas.2023-02396

9. Строганова И. Я., Войтова К. В. Методы обнаружения и идентификации респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота в культуре клеток // Вестник КрасГАУ. – 2011. – №3. – С. 128-133. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/metody-obnaruzheniya-i-identifikatsiirespiratorno-sintsitialnogo-virusa-krupnogorogatogo-skota-v-kulture-kletok (дата обращения: 04.08.2025).

10. Chamorro M. F., Palomares R. A. Bovine respiratory disease vaccination against viral pathogens. Modified-live versus inactivated antigen vaccines, intranasal versus parenteral, what is the evidence? // Vet. Clin. North Am. Food Anim. Pract. – 2020. – № 36. – Р. 461–472. https://doi.org/10.1016/j.cvfa.2020.03.006.

11. Modified-live versus inactivated respiratory viral vaccines for revaccinating beef calves at weaning / C.A. McNeff, C.A. Robison, B.K. Wilson [et al.] // Applied Animal Science. – 2023. – № 39 (1). – С. 1-13. https://doi.org/10.15232/aas.2022-02332

12. Reed L., Muench H. A simple method of estimating fifty per cent endpoints // American Journal of Epidemiology. – 1938. – № 27(3). – С. 493-497.

13. Calnec, B.W., Ljarrido E., Okazaki W. In vitro methods for assay of turkey herpes virus / V Avian Dis. – 1972. – V.16. – P.52-56. https://n2t.net/ark:/87292/w9sj33

14. Дизайн праймеров для индикации патогенных лептоспир методом гнездовой полимеразной цепной реакции в режиме реального времени / К.В. Усольцев, Р.И. Шангараев, К.С. Хаертынов [и др.] // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. – 2025. – № 2. – С. 95-106. https://doi.org/10.36871/vet.zoo.bio.202502111

15. Дизайн специфических олигонуклеотидов для выявления контаминации культур клеток возбудителем вирусной диареи и микоплазмами при разработке интраназальной вакцины против респираторных болезней новорожденных телят / Н. И. Хаммадов, М. Е. Горбунова, М. А. Ефимова [и др.] // Ветеринарный врач. – 2025. – № 3. – С. 98-104. – https://doi.org/10.33632/1998-698X_2025_3_98.