Влияние секретома мезенхимальных стволовых клеток лошади на агрегацию тромбоцитов in vitro

Исследовали влияние секретома МСК лошади на способность к индукции тромбообразования in vitro путем визуального оценки агрегации тромбоцитов под действием данного препарата на предметном стекле по методу А. С. Шитиковой, наблюдая процесс под фазовым контрастом. Определение влияния секретома на тромбообразование in vitro проводили на тромбоцитарной плазме, выделенной из крови лошадей с антикоагулянтом - цитратом натрия. В пробирки с тромбоцитарной плазмой вносили физиологический раствор (контроль 1), 10,0% раствора хлорида кальция (контроль 2), секретом в пропорции 10 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома (опыт 1), секретом в пропорции 20 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома (опыт 2), секретом в пропорции 20 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома и 10,0% раствора хлорида кальция (опыт 3). После добавления контрольных и опытных препаратов к образцам тромбоцитарной плазмы, 10,0 мкл смеси микроскопировали при увеличении Х400 используя фазовый контраст. В результате наших исследований были получены данные, указывающие на то, что у секретома МСК лошади отсутствует способность индуцировать агрегацию тромбоцитов. Плазма, обогащенная тромбоцитами, полученная от лошадей (n=10) с цитратом натрия не проявляла признаков агрегации, в отличие от плазмы, обогащенной тромбоцитами с цитратом натрия, активированная хлористым кальцием. При добавлении секретома в концентрациях 10 к 1 (10 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома) и 20 к 1 (20 частей объема плазмы, обогащенной тромбоцитами к 1 части секретома) агрегация тромбоцитов также не наблюдалась. В то же время, при внесении хлористого кальция в образец плазмы, обогащенной тромбоцитами с добавлением секретома, агрегация тромбоцитов была в пределах нормы.

1. Novel potency assay for MSC secretomebased treatment of idiopathic male infertility employed Leydig cells and revealed vascular endothelial growth factor as a promising potency marker / A. Monakova, G. Sagaradze, N. Basalova, et al. // Int J Mol Sci. – 2022. – V. 23. - № 16. – Р. 9414.

2. Изучение безопасности оригинального препарата на основе секретома мезенхимных стромальных клеток при локальном введении в яички и при внутримышечном введении крысам / А.О. Монакова, Г.Д. Сагарадзе, В.Ю. Балабаньян и др. // Безопасность и риск фармакотерапии. - 2024. - №1. - С.99-116.

3. Characterization of secretomes provides evidence for adipose-derived mesenchymal stromal cells subtypes / N. Kalinina, D. Kharlampieva, M. Loguinova, et al. // Stem Cell Res Ther. – 2015. - № 6. – Р. 221.

4. Савченкова, И.П. Внеклеточные везикулы, в том числе экзосомы, из мезенхимных стволовых/стромальных клеток животных / И.П. Савченкова, Г.А. Надточей // Сельхозбиология. - 2023. - №6. – С. 1112-1121.

5. Расширенные исследования безопасности биологического лекарственного препарата на основе секретома мезенхимных стромальных клеток человека: иммунотоксичные и онкогенные свойства / А. О. Монакова, В. Ю. Балабаньян, В. А. Вавилова и др. // Лабораторные животные для научных исследований. - 2025.- №3. - С. 56-65.

6. Влияние кондиционированной среды мезенхимальных стромальных клеток барана на качественные показатели сперматозоидов/ Е. А. Корочкина, А. В. Трифонова, А. Ю. Нечаев, В.С. Пушкина, Д.Е. Главацкая // Международный вестник ветеринарии. – 2024. – № 2. – С. 276-284.

7. Teixeira, F.G. Mesenchymal stem cells secretome: current trends and future challenges / F.G. Teixeira, A.J. Salgado // Neural Regen Res. – 2020. – V. 15. - № 1. – P. 75.

8. Куралесова, А.И. Экзосомы, продуцируемые мезенхимальными стромальными клетками, для терапии острого респираторного дистресс-синдрома: обзор доклинических и клинических исследований / А.И. Куралесова, А.Г. Грошева, Е.Н. Генкина, и др. // БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. - 2025. - №3. – С. 343-356.

9. Mesenchymal stromal cell-derived secretome-based therapy for neurodegenerative diseases: overview of clinical trials / M. Ghasemi, E. Roshandel, M. Mohammadian et al. // Stem Cell Res Ther. - 2023. - V. 14. - №.1. - P.122.

10. Viktorova, E.V. Мultipotent mesenchymal stem cells in clinical veterinary practice / E.V. Viktorova, I.P. Savchenkova // IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. – 2020. – V. 548. – Р. 072072.